Výběr Aniontů Výměna Sloupec

volba anion výměnné kolony závisí na řadě faktorů, které ovlivňují chromatografickou separaci, včetně nabíjecí charakteristiky obou cílové molekuly(s) a jiné molekuly ve vzorku, objem a koncentrace vzorku a průtok a tlak limity chromatografický systém. Bio-Rad nabízí širokou škálu sloupců pro výměnu aniontů, které pokryjí vaše potřeby. Různé typy anion exchange sloupy byly optimalizovány pro řadu aplikací:

Závazné a protitlaku vlastnosti UNOsphere Q podpora:
5 mg/ml vzorek BSA v 10 mMTris, pH8.5, bylo naloženo na 1.1 x 20 cm sloupce. Červená, protitlak; modrá, průlomová kapacita 10%.

• Vysoké rozlišení separace
• Aplikace z preparativní separace leštění
• Běží na nízké, střední, nebo vysoké průtoky
• zahrnuje různé analytu velikost se pohybuje
• Kompatibilita s běžně používanými nárazníkové systémy a soli
• Matice s buď silné nebo slabé funkční skupiny
• Různé matice typů včetně makroporézní a kontinuální neporézní
• Nízký protitlak
• Kompatibilita s různými vzorku viskozitou a provozní teploty

Anion Exchange Sloupec Design

Iontové výměny chromatografie se používá k oddělení nabitých molekul. Ve sloupci výměny aniontů je obal kladně nabitý, a proto si zachovává záporně nabité molekuly coulombickou interakcí. Vázané molekuly jsou eluovány aniontovým gradientem. Pro molekuly s více nabitými skupinami, jako jsou proteiny, je to celkový náboj v dané chemii pufru (pH atd.), která určuje, zda a jak silně se molekula váže na stacionární fázi kolony.

kolony aniontové chromatografie jsou k dispozici s maticemi, které mají silné nebo slabé funkční skupiny. Silná matrice výměny aniontů je kvartérní amonium, a je označen Q. slabá matrice výměny aniontů je diethylaminoethyl, nebo DEAE. Střední pevnost pryskyřice, který obsahuje především terciární s některými kvartérními aminy, je také k dispozici.

pH pufru ve sloupci určuje náboj každé ze složek ve vzorku. Náboj silné anionovými je minimálně změnit pH a může pracovat v širokém rozsahu pH. DEAE je více ovlivněna změnami pH, s obvyklým provozním rozsahem pH 7-10.

dostupnost širší pracovní rozsah pH se silnou aniontovou výměnu sloupců poskytuje schopnost používat pH změnit náboj cílové molekuly, aby se jim vázat silněji, více slabě, nebo vůbec ne. Chromatografie může být prováděna v pozitivním režimu, kdy se cíl (y) zájmu silně váže na kolonu a (mnoho) jiných molekul se neváže tak silně. Negativní režim je běžný v leštění, kde se kontaminanty vážou na kolonu výměny aniontů a cílová molekula se neváže, a proto se na koloně nezachovává.

eluce se obvykle dosahuje gradientem soli. Nejběžnější ionty jsou PO43 -, SO42 -, COO – a Cl -. Volba aniontu závisí na požadovaném elučním profilu a na tom, které ionty jsou kompatibilní s budoucím čištěním nebo budoucím použitím analytu(analytů).

aplikace kolon pro výměnu aniontů

kolony pro výměnu aniontů se značně používají pro čištění biomolekul. Existuje široký výběr typů sloupců, velikostí a různých sil funkčních skupin. V kombinaci s optimalizovaným vazebné a eluční podmínky, anion výměnné kolony chromatografie může být použita ve všech fázích molekuly izolace a analýzy, včetně počáteční vyčištění, čištění, separace analytů a odstranění znečišťujících látek, jako jsou endotoxiny, proteiny hostitelské buňky, nebo iontové sloučeniny.