Různé studie ukázaly, priony (PrPSC), která infikovat ovce a kozy s fatální přenosné encefalopatie známá jako klusavky, jsou schopny přetrvávat v půdě po dobu let bez ztráty jejich patogenní působení. Šíření prionů do prostředí, může nastat z několika zdrojů: především, infekční placenty nebo plodové vody ovcí a možná kontaminace životního prostředí, slinami nebo výkaly.

Konfirmační testování pro klusavky může být dosaženo pouze za použití imunohistochemie onemocnění spojené prionového proteinu (PrPSC) do tkání odebraných post mortem, včetně obex (struktury mozkového kmene), retrofaryngeální lymfatických uzlin a palatine mandle. V roce 2008 byl schválen diagnostický, nikoli potvrzující Test na živých zvířatech pro imunochemické testování na lymfoidní tkáni odvozené z rektální biopsie USDA.

Lidské prionové bílkoviny, zbytky 125-228, vytvořené z proteinové databáze (PDB) vstup 1QM3. Zbarvení ukazuje, subdomény, které jsou navržené k zahájení přeměny z normálních buněčných na klusavky podobě pomalé pohyby.

Přírodní přenosu klusavky v oblasti zdá se, že dojít prostřednictvím zažívacího traktu ve většině případů, a klusavky-zdarma stád ovcí může nakazit na pastviny, kde epidemie klusavky byly pozorovány dříve. Tato zjištění poukazují na trvalou nákazu v životním prostředí, zejména v půdě.

koncentrace prionů v porodních tekutinách nemění infekčnost prionů. Přirozeně nebo experimentálně infikované Ano a bahnice přenášejí infekci na jehňata, i když placenty mají málo PrPSC. PrPSC je vylučován vyšším procentem u ovčích placent (52-72%) než u kozí placenty (5-10%) ve studijních studiích na USDA Agricultural Research Service.

detekovatelné PrPSC byly hlášeny ve stolici ovcí jak v terminálním, tak v časných preklinických stádiích onemocnění, což naznačuje, že priony budou pravděpodobně vylučovány do životního prostředí v průběhu onemocnění. Lze předpokládat několik zdrojů prionů ve stolici, včetně požití životního prostředí a polykání infikovaných slin; nejpravděpodobnějším zdrojem je však vylučování z lymfatické tkáně spojené se střevem. Přežvýkavců mají specializované peyerových plátů, po celé délce ilea, množství asi 100 000 folikulů, a všechny z nich by mohl být napaden a ubývání priony do lumen.Priony klusavky byly nalezeny v Peyerových náplastech přirozeně infikovaných asymptomatických jehňat již ve věku čtyř měsíců.

expozice kontaminovaným očkovánímeditovat

• kontaminovaná očkovací látka Luping-ill. Také známý jako 1935 Moredun Louping-nemocná očkovací katastrofa.. U více než 1500 ovcí se po očkování vyvinula klusavka. „Vyšetřování etiologie klusavky následoval očkování ovcí pro louping-ill virus s formaldehydem ošetřených výtažky z ovcí lymfatické tkáně nevědomky kontaminované priony scrapie (Gordon 1946). O dva roky později se z této vakcíny vyvinula klusavka u více než 1500 ovcí.““Tato vakcína byla vyrobena za použití formalizovaných ovce mozek kontaminovány klusavky agent“ „V roce 1946, National Veterinary Medical Association z Velké Británie a Irska. Výroční Kongres, W. S. Gordon, PhD, předložila důkazy o přenosu klusavky prostřednictvím vakcíny proti louping-ill.““Dr. Gordon vyvinul v letech 1931-32 účinnou vakcínu, která má zabránit loupání. Po čtyřech letech polních pokusů byla jeho vakcína vyrobena ve třech dávkách pro široké použití v roce 1935. Vakcína byla vyrobena z tkání mozku, míchy a sleziny odebraných ovcím pět dní poté, co dostaly intracerebrální inokulaci viru Luping-ill. K 10% solné suspenzi byl přidán Formalin, aby se virus inaktivoval. Během let 1935 a 1936 nebyly u naočkovaných zvířat zaznamenány žádné škodlivé účinky. Pak dva majitelé hlásili klusavku u svých ovcí Blackface, kteří byli naočkováni očkovací látkou proti lupingu (šarže 2) před dvěma a půl lety. Klusavka nebyla v plemeni Blackface dříve vidět. Po vyšetřování Dr .. Gordon zjistil, že 8 jehňata používá k výrobě šarže 2 se narodil na bahnice, kteří byli vystaveni klusavky; některé bahnice vyvinutý klusavky v 1936-7. Dr. Gordon předpokládal, že“ infekční agens klusavky „byl přítomen v tkáních jehňat používaných k výrobě šarže 2 a že toto činidlo“ by mohlo odolat koncentraci formalinu…který inaktivoval virus Luping nemocný; mohl být přenášen subkutánní inokulací; měl inkubační dobu dva roky nebo déle.“Čtyři a půl roku trvající experiment zahrnující 788 ovcí iniciovala asociace pro výzkum chorob zvířat v roce 1938. Vědci zjistili, že 60% z běžné ovce naočkována intracerebrally s fyziologickým roztokem suspenze mozkové a míšní tkáně odebrané z ovce s klusavky vyvinutý klusavky v rámci těchto čtyř a půl let. Inkubační doba byla sedm měsíců a více. Pouze 30% ovce užívajících subkutánní inokulaci suspenze vyvinutý klusavky v té době, a inkubační doba v této skupině bylo 15 měsíců a nahoru. Vědci dospěli k závěru, že infekční agens byl pravděpodobně filtrable virus.“
• kontaminovaná vakcína Mycoplasma agalactiae. V letech 1997 a 1998 došlo v Itálii k vypuknutí klusavky u ovcí a koz a příčina byla přičítána vakcíně. „Náhodná infekce vakcínou byla navržena jako vysvětlení náhlého nárůstu ohnisek klusavky v Itálii v letech 1997 a 1998. Tento článek popisuje nedávné vypuknutí klusavky u ovcí a koz, které byly vystaveny stejné vakcíně. Od roku 1992 nebyly do stáda dovezeny žádné bahnice ani kozy, ale vakcína proti Mycoplasma agalactiae byla podána dvakrát, v letech 1995 a 1997. U obou druhů byla zaznamenána vysoká míra hrubé úmrtnosti a výskytu klusavky, byly zapojeny všechny kohorty narození a byla ovlivněna velká část starých zvířat. Vzor mozkových lézí byla pozorována, s drobnými rozdíly mezi ovcí a koz, který byl velmi podobný vzor pozorovat u zvířat dříve vystaveni stejné vakcíny, ale jasně liší od pozorované v mozku ovcí s klusavky v hejnu není vystaven očkovací látky. Bez ohledu na jejich stav expozice ukázala genotypová analýza ovcí přítomnost polymorfismu pouze na kodonu 171. Vzorce výskytu i mozkových lézí poskytují důkaz, že epidemie klusavky byla způsobena použitím vakcíny.““Náhodné intra – a mezidruhové přenosu klusavky došlo v Itálii v letech 1997 a 1998 po expozici vakcína proti Mycoplasma agalactiae. PrP (Sc) u postižených ovcí a koz, odebraných z jediného hejna vystaveného vakcinaci o 2 roky dříve, byl molekulárně zadán. U pěti zvířat s iatrogenní klusavkou byl ve všech zkoumaných oblastech mozku nalezen typ PrP (Sc) s fragmentem jádra 20 kDa. Ve tři ovce a jedna koza, tato izoforma se pojila s plně glykosylované izoformy, že měl proteáza-rezistentní páteří 17 kDa, vzhledem k tomu, že ve dvě ovce a čtyři kozy, dva PrP(Sc) typy byly zjištěny v různých regionech mozku. U ovcí s přirozenou polní klusavkou byl nalezen typ PrP (Sc) s fyzikálně-chemickými vlastnostmi nerozeznatelnými od izoformy 20 kDa. Současné výsledky naznačují současnou přítomnost dvou prionových kmenů v homogenátech mléčné žlázy a mozku používaných k vakcinaci.“

expozice kontaminovanou půdouedit

požití půdy pasoucími se ovcemi bylo měřeno ve dvou typech půdy, při dvou sadbách a během dvou období pastvy. Zvířata požila od května do listopadu až 400 g půdy na kg tělesné hmotnosti. Srážky a míra skladování se objevily jako faktory ovlivňující požití. Vliv typu půdy a typu vegetace byl méně patrný.

průměrná hmotnost dospělé ovce je kolem 250 liber. Pokud dospělá Ovce snědla 400 g / kg půdy, jak předpovídali D. McGrath et al., pak by průměrná Ovce spolkla asi 45 000 g během šesti měsíců nebo 251 g denně. Za předpokladu, že půda byla kontaminována priony (PrPSC) z výkalů nebo porodních tekutin, pak by se ovce potenciálně nakazily. Koncentrace prionů v půdě je nejistá a koncentrace není přímo úměrná infekčnosti. Bylo prokázáno, že faktory ovlivňující infekčnost prionů v půdě zahrnují délku času v půdě a vazebné schopnosti půdy.

Pro podrobné posouzení rizik klusavky-kontaminované půdě, to byl velký význam analyzovat, zda zjistitelné PrPSc v půdě výtažky stále vystavoval ústní infekce po inkubační době až 29 měsíců. Biologická zkouška se syrskými křečci byla provedena krmením zvířat kontaminovanou půdou nebo vodnými půdními extrakty, které byly shromážděny po inkubaci půdy po dobu 26 a 29 měsíců. Křečci krmeni kontaminovanou půdou vykazovali své první příznaky spojené s klusavkou po dvou týdnech až šesti měsících (95% CI) po prvním krmení. Křečci dosáhli konečné fáze klusavky po pěti až 21 měsících (95% CI) po prvním krmení. To naznačovalo značné množství přetrvávající infekčnosti v půdě, která byla inkubována po dobu 26 a 29 měsíců. Na Islandu v roce 1978 byl zaveden program eradikace klusavky a postižená stáda byla utracena, prostory byly dezinfikovány a ovce byly spáleny; po dvou až třech letech byly prostory doplněny jehňaty z oblastí bez klusavky. V letech 1978 až 2004 se klusavka opakovala na 33 farmách. Devět recidiv se objevilo 14-21 let po utracení v důsledku trvalé kontaminace životního prostředí PrPSc.

bylo prokázáno, že vazebné schopnosti různých typů půd zvyšují průnik choroby do populace. Půda obsahující běžný jílový minerál montmorillonit (Mte) a kaolinit (Kte) se s priony váže účinněji než půda obsahující křemen. Zvýšená přenosnost prionů vázaných na půdu může vysvětlit šíření klusavky na životní prostředí navzdory nízkým hladinám vrhaným do životního prostředí. Mechanismus, kterým Mte nebo jiné složky půdy zvyšují přenosnost prionů vázaných na částice, je třeba objasnit. Vazba prionů na Mte nebo jiné složky půdy může částečně chránit PrPSC před denaturací nebo proteolýzou v zažívacím traktu, což umožňuje odebrání více patogenů ze střeva. Adsorpce PrPSc půdy může změnit stav agregace proteinu, posun distribuce velikosti směrem k více infekční prionové bílkoviny částic, čímž se zvyšuje infekčních jednotek. Aby bylo prionové onemocnění přenášeno požitím prionové kontaminované půdy, musí priony také zůstat infekční orální cestou expozice. Vědci z University of Wisconsin zkoumali orální infekčnost prionů vázaných na Mte a vázaných na půdu. Účinky prion zdroje (prostřednictvím infikovaných homogenátu mozku a čistí PrPSc) a dávky na penetrancí (podíl zvířat nakonec vykazující klinické příznaky scrapie) a inkubační doba (doba nástupu klinických příznaků) byla hodnocena. O 38% zvířat léčených perorálně 200 ng nevázaného, vyjasnit PrPSc odvozen od půdy vykazovaly klinické příznaky, inkubační doba u infikovaných zvířat 203 633 dny. Všechna zvířata perorálně podávaná s ekvivalentním množstvím PrPSc vázaného na Mte projevila příznaky onemocnění za 195 až 637 dní. Naproti tomu zvířata perorálně přijímající půdu Mte samotnou nebo jednu desetinu tolik nevázaného objasněného PrPSc (20 ng)zůstala asymptomatická po celou dobu experimentu. Tyto údaje zjistilo, že Mte-vázané priony zůstávají infekční orální cestou expozice, a to pojiva Mte zvyšuje penetrance onemocnění, zvýšení účinnosti orální přenos.

Expozice prostřednictvím kontaminované seno, roztoči

„S klusavky, archetypální TSE, což je přirozený onemocnění ovcí a koz, nemoc se může objevit náhle v hejnu v absenci známé expozice na nakažená hejna (Palsson, 1979). Konečně, pole na Islandu, které byly prázdné po dobu až 3 let po zničení klusavky-infikovaných hejn, byl znovu osídlen se známými klusavky-zdarma ovce, a některé ovce v této druhé skupině se následně vyvinula klusavky (Palsson, 1979). Poslední ‚experiment v přírodě‘ přineslo podobné výsledky několikrát na Islandu a ve Spojeném Království. Na jedné Islandské farmě byla hejna třikrát eradikována; pokaždé byla farma ponechána bez ovcí po dobu 2 let a po doplnění ovcí z oblastí bez klusavky se choroba znovu objevila. Před několika lety padl návrh (Y Sigurdarson, osobní sdělení), že seno roztoči by to být dobrý kandidát jako vektor pro klusavky; to vedlo k infekci myší s roztoči vzorcích připravených ze sena získané od pěti Islandské farmy. Deset z těchto 71 myší onemocnělo po injekci roztočovými přípravky ze tří z pěti farem (Wisniewski et al, 1996; Rubenstein et al, 1998). Inkubační doby se pohybovaly od 340 dnů do 626 dnů a tyto myši měly proteázově rezistentní formu PrPSc, hostitelem kódovaného glykoproteinu, PrPc . Proteázově rezistentní forma je markerem onemocnění TSE (Prusiner, 1991; Parchi et al, 1996). U některých z těchto klinicky pozitivních myší byl pruhovaný vzor na analýze WB jedinečný (Wisniewski et al, 1996; Rubenstein et al, 1998).“

souhrn Přenosueditovat

priony (PrPSc) se vylučují z ovcí a koz do porodních tekutin, výkalů a jiných exkrementů. Koncentrace prionů je nejistá, ale není přímo úměrná infekčnosti. Ovce požít značné množství půdy, tak půdy představuje věrohodné environmentální nádrž klusavky priony, které mohou v životním prostředí přetrvávat roky. Dlouhověkost prionů a připojení půdních částic pravděpodobně ovlivňuje perzistenci a infekčnost prionů v životním prostředí.

V současné době chybí účinné metody inaktivace prionů v půdě a účinky přirozených degradačních mechanismů na infekčnost prionů nejsou do značné míry známy. Lepší porozumění procesům ovlivňujícím mobilitu, Perzistence a biologická dostupnost prionů v půdě je zapotřebí pro řízení prostředí kontaminovaného priony. Systém pro odhad priony-vazebné kapacity půdy na farmách pomocí jednoduché analýzy půdy může umožnit odhad prion riziko v prostředí, a zda se mění prion závazné využívání půdy, změny mohou pomoci zmírnit infekční priony. Lišejníky, konkrétně, Parmelia sulcata, Cladonia rangiferina a Lobaria pulmonaria, může mít potenciál pro snížení množství prionů, protože některých druhů lišejníků obsahují proteázy, které ukazují slib v rozepisovat prion. Další práce na klon a charakterizovat proteázy, posoudit jejich účinky na prionové nákazy, a určit, které složky organismu nebo organismů ve lišejníky produkují nebo ovlivnit aktivita proteázy je opodstatněná a je v současné době předmětem vyšetřování.