undersøgelse site og emne screening
kliniske forsøg blev udført på det kliniske Forskningscenter ved University of Michigan hospitaler med godkendelse fra institutionel revision Board for undersøgelser, der involverer mennesker og fra Food and Drug Administration. Informeret samtykke blev opnået fra hvert emne.
forsøgspersoner blev vurderet efter alder, vægt og evne til at overholde protokollerne. De blev screenet for sundhed / sygdom og brug af medicin, alkohol og tobak. Blod blev vurderet for elektrolytbalance, nyre-og leverfunktion samt blodmorfologi og lipider. De krævede indgangskoncentrationer til mekanismestudiet var 5,18 mmol l−1 (>200 mg dl−1) total cholesterol, 4,14 mmol l−1 (>160 mg dL-1) lipoproteinkolesterol med lav densitet (LDL-kolesterol) og 3.39 mmol l−1 (300 mg 300 mg dL-1) triglycerider. I langtidsstudiet skulle total cholesterol være 5,18 – 7,77 mmol l−1 (200-300 mg dl−1), LDL-cholesterol 3,37 mmol l−1 (>130 mg dl−1) og triglycerider 4,52 mmol l−1 (gir 400 mg dl−1). Kvinder i den fødedygtige alder blev screenet for graviditet og instrueret i at bruge prævention under undersøgelsen.
Mekanismestudie
af de 12 forsøgspersoner var otte kvinder med gennemsnitlig alder 39,5 (interval, 29-59) år, gennemsnitligt total kolesterol 6,48 (interval, 5,57–7.51) mmol l−1 (250 (interval, 215-290) mg dl–1) og middelvægt 79,3 (interval, 58,3-116,3) kg. Tilsvarende værdier for de fire mænd var 36,5 (interval, 34-40) år, 6,60 (5,57–7,64) mmol l−1 (255 (interval, 215-295) mg dl−1) total cholesterol og 94,5 (interval, 84,5–106,8) kg.
der var fire 1-ugers studiefaser med en 1-ugers udvaskningsperiode mellem faser. I hver fase—administreret i henhold til en randomiseret, enkeltblind, crossover-design—forbrugte forsøgspersoner 250 ml af en sukkerfri gelatinedessert indeholdende enten 5 g HPMC (testfaser) eller ingen HPMC (placebo-fase). Gelatinedesserten blev konsumeret under morgenmad, frokost og middag til i alt 15 g HPMC om dagen i hver testfase.
viskositeter (målt i henhold til United States Pharmacopeia, 2003) af gelatinedesserten fra de fire faser var: placebo-gelatine (0, 3 cP), HPMC med medium viskositet (3915 cP), HPMC med høj viskositet (22 703 cP) og HPMC med ultrahøj viskositet (63 030 cP). Alle HPMC-produkter var fødevarekvalitet og overholdt monografien Hypromellose Type 2208 (United States Pharmacopeia, 2003).
fødeindtagelse blev kontrolleret gennem hele mekanismestudiet for at sikre, at den eneste diætforskel mellem grupper var tilstedeværelsen eller fraværet af HPMC. Emner spiste alle måltider på General Clinical Research Center og valgte måltider svarende til deres sædvanlige kost. I studieuge 1 blev al forbrugt mad opgjort. I efterfølgende faser blev typer og mængder af forbrugt mad reproduceret.
på dag 1 og 8 i hver fase blev vægt, vitale tegn og serumlipider målt efter en hurtig overnatning. Elektrolytter, lever-og nyrefunktion og blodmorfologi blev målt på den første og sidste studiedag.
effekten af HPMC på fedtabsorption blev undersøgt ved måling af fækalt fedtindhold. I løbet af placebo-og ultrahøj viskositetsfaserne afsluttede alle forsøgspersoner en 72-timers afføring på dag 5, 6 og 7.
langtidsstudie
af de 40 forsøgspersoner var 20 kvinder med middelalder 41,6 (interval, 27,3-55,9) år, gennemsnitligt serum total cholesterol 5,96 (interval, 5,43–6,48) mmol l–1 (230,0 (interval, 209,8−250,2) mg dL–1), gennemsnitligt LDL−kolesterol 4,05 (interval 3,57-4,53) mmol l–1 (156.4 (interval 137,9–174,9) mg dl−1) og gennemsnitsvægt 75,3 (interval 59,8–90,8) kg. Tilsvarende værdier for de 20 mænd var 38,3 (interval, 25,9–50,3) år, 6,05 (interval, 5,46–6,63) mmol l−1 (233,4 (interval, 210,9–255,9) mg dl−1) total cholesterol, 4,26 (interval, 3,74–4,78) mmol l−1 (164,4 (interval, 144,4–184,4) mg dl−1) LDL-1 kolesterol og 87,9 (interval, 75,7–101,1) kg vægt.
to doser, 5 og 15 g dag−1, af HPMC med ultrahøj viskositet blev sammenlignet med placebo for kolesterolsænkende evne hos mildt hyperkolesterolemiske forsøgspersoner ved anvendelse af et randomiseret, dobbeltblindet, placebokontrolleret parallelt design. HPMC blev administreret i en varm chokoladedrik sammen med morgenmad (5 og 15 g dag−1 behandlingsgrupper) og i sukkermelassekager med frokost og middag (15 g dag-1 behandlingsgruppe). Cookieformuleringen er detaljeret i
antallet af forsøgspersoner i hver behandlingsgruppe blev bestemt ved effektberegninger baseret på forventet kolesterolsænkende effekt ved de to doser (estimeret til 1% pr.g HPMC pr. dag) og tidligere observerede variationskoefficienter i total cholesterol data. Selvom effektberegninger viste, at fem forsøgspersoner ville være tilstrækkelige, blev 10 tilmeldt gruppen 15 g HPMC pr.dag og 10 for placebogruppen for at tage højde for den lavere hydratiseringshastighed for HPMC i cookies og undersøgelsens længde. Tyve forsøgspersoner blev tilmeldt gruppen 5 g HPMC pr. dag, fordi den kolesterolsænkende effekt forventedes at være mere beskeden.
den varme chokoladedrik indeholdende 5 g HPMC blev ikke accepteret af forsøgspersonerne, der straks klagede højt over dets ikke-velsmag og truede med at opgive undersøgelsen i slutningen af uge 1. Derefter blev en 1-ugers udvaskningsperiode påberåbt for alle forsøgspersoner (uge 2), og begyndende med Uge 3 modtog alle forsøgspersoner 5 g HPMC-cookie-formuleringen i stedet for 5 g HPMC-varm chokoladedrik ved morgenmaden. Forsøgspersoner, der fik placebo, blev skiftet til en placebo-cookie i stedet for placebo-varm chokolade for at opretholde blinding. Der var ingen efterfølgende klager vedrørende velsmag. Protokollen for den langsigtede undersøgelse er vist i tabel 1.
langtidsstudiet var en ambulant undersøgelse, hvor forsøgspersoner rapporterede dagligt for at hente deres drikkeblanding (uge 1), cookies (uge 1, 3-8) og eventuelle nødvendige formularer. Emner indtog deres sædvanlige måltider sammen med undersøgelsesformuleringerne. Mad-og træningsdagbøger blev registreret 1 uge før undersøgelsen og i uge 1, 4 og 8. Overholdelse af forbruget af testformuleringerne blev vurderet dagligt.
analyse af prøver og spørgeskema
biokemiske og lipidmålinger blev udført på de kliniske laboratorier ved University of Michigan hospitaler ved hjælp af en valideret metode, der udviste 1% variation i total cholesterol (TC) koncentration inden for prøve og 2,2% variation mellem dage. LDL – C blev beregnet ud fra TC -, lipoproteinkolesterol med høj densitet (HDL-C) og TG-koncentrationerne ved hjælp af formlen:
afføring samlinger blev analyseret af Mayo Clinic (Rochester, MN, USA) ved hjælp af en NMR-baseret procedure, der involverer mikrobølgetørring, efterfulgt af estimering af procent FAST og procent fedt via signalanalyse af de resterende protoner (Van De Kamer, 1958). Sammenlignet med den etablerede, standard gravimetriske metode varierede værdierne for procent FAST og fedtindhold med henholdsvis 2 og 6%.
spørgeskemaer vedrørende bivirkninger blev udfyldt på dag 1 i begge forsøg, på dag 7 i hver fase af mekanismestudiet og på dag 7 i uge 1, 3 og 6 i langtidsstudiet. Ingen effekt (0), mild effekt (1=mindre end 30 min, 2=mere end 30 min), moderat effekt (3=mindre end 30 min, 4=mere end 30 min) og alvorlig effekt (5=mindre end 30 min og 6=mere end 30 min). Der blev også givet plads til emner til registrering af andre bivirkninger.
afføring og konsistens blev rapporteret på dag 5, 6 og 7 i placebo-og ultrahøjviskositetsfaserne i mekanismestudiet. Tarmbevægelseskonsistens blev scoret som følger: 1 (flydende), 2 (løs, blød, fragmenteret afføring), 3 (blød, men kontinuerlig afføring), 4 (fast afføring) eller 5 (vanskeligheder med passage på grund af stivhed).
statistisk analyse
i mekanismestudiet blev alle målinger undtagen fækalt fedt testet for signifikante forskelle med gentagne målinger variansanalyse (SuperAnova, Abacus Concepts, Berkeley, CA, USA) ved hjælp af Tukeys kompromis som en post hoc-test. Fækale fedtdata blev analyseret med den parrede t-test.
i langtidsstudiet blev data behandlet med univariate (f.eks. den ikke justerede univariate f-statistik) og multivariate (f. eks., Cary, NC, USA). De to tilgange gav lignende resultater. De analyserede faktorer var uge (inden for emnet) og behandlingsgruppe, køn og alder (mellem forsøgspersoner). Nulhypoteserne var, at der ikke eksisterede uge -, uge-for-køn -, uge-for-alder-eller uge-for-gruppe-interaktioner.
alle forskelle blev anset for signifikante ved konfidensniveauet på 95%.