diskussion og konklusion

immunkompetente celler og deres forstadier gennemgår en kompleks række begivenheder, når de udfordres med et antigen for at proliferere og enten syntetisere antistof eller blive involveret i cellulære immunresponser. I tilfælde af virusinfektion er det blevet bredt accepteret, at humoral eller cellemedieret immunitet over for de virus-og virusassocierede antigener er meget beskyttende, skønt immunopatologiske læsioner i nogle tilfælde forekommer på grund af en “autoimmun” type respons på det virusinducerede antigen på målvæv. Imidlertid er de kontrasterende typer interaktion mellem en virus og immunocytter, dvs.depression eller ændring af immunresponsivitet, blevet meget mindre undersøgt end interaktionerne, der resulterer i antivirusimmunitet. I denne henseende er de murine leukæmivirus blevet undersøgt i de senere år med hensyn til virkninger på immunresponser (1-6). Det bliver helt tydeligt, at leukæmivirus fortrinsvis kan påvirke immunocytter og forstadier, der afviger disse celler fra veje med normal immunresponsivitet.

i de her beskrevne undersøgelser blev ven leukæmi-viruskomplekset anvendt til at undersøge arten af virus-lymfocytinteraktioner, både in vivo og in vitro. In vivo-undersøgelser lider imidlertid af de problemer, som sådanne vira ikke kun kan replikere i lymfoidvæv, men naturligvis i andre væv. Desuden tilføjer det ændrede trafikmønster af inficerede celler til lymfoide organer såvel som inden i organerne en stor kompleksitet til analyse af virusets virkninger på immunocytter. Det er almindeligt anerkendt, at virusinficerede lymfocytter kan vise unormal homing evne, så det normale trafikmønster forstyrres (17,18). Dette kunne forklare de store ændringer i arkitekturen af lymfoide organer af leukæmivirusinficerede dyr. Desuden kan virusinfektion i sig selv inducere antigener, der er” fremmede ” til normale og endnu ikke påvirkede lymfoide celler, som derefter kan reagere på en skadelig måde på de inficerede lymfocytter. Således kan en” autoimmun ” type læsion forekomme på grund af virusinfektion in vivo. Ikke desto mindre har undersøgelser i dette laboratorium såvel som andre tydeligt vist, at modtagelige stammer af mus inficeret med en leukæmivirus viser markant deprimeret antistofrespons over for T-afhængige antigener, såsom SRBC. I andre undersøgelser er immunsuppression over for T-afhængige antigener blevet påvist. Endvidere cellulær immunitet som fremkaldt af lydhørhed over for mycobakterielle antigener, alloantigener osv., kan også være markant deprimeret hos oncornavirus inficerede dyr.

selvom det tidligere blev følt af nogle efterforskere, at en sådan deprimeret immunrespons kan afspejle “forskydning” af normale immunocytter af transformerede leukæmiske celler, viste kinetiske undersøgelser, at depression af immunitet udvikler sig længe før markante ændringer af lymfoidcellearkitektur eller symptomer på sygdom bliver tydelige. Det forekommer plausibelt, at virus kan inficere B-celler eller deres forstadier og afvige dem fra den normale vej for immunresponsivitet. En række undersøgelser har antydet, at antistofprecursorcellerne kan være et præferencemål for MuLV, og at når først virusinfektion forekommer, er sådanne immunocytter ikke længere kompetente til at reagere på antigen og gennemgå transformation til en immunkompetent celle. Forskellige celleoverførselsundersøgelser understøttede denne opfattelse, da lymfoide cellers evne til at montere et immunrespons i bestrålede modtagermus blev markant formindsket, når donordyrene tidligere var inficeret med virussen. Det forekom ikke sandsynligt, at virus blev overført til modtagerne, især da forskellige kontroller viste, at FLV-virus ikke replikerede godt hos bestrålede modtagere.

ultrastrukturelle undersøgelser med inficerede Milter understøttede synspunktet om, at prækursorimmunkompetente celler hovedsageligt var påvirket af virusinfektion. Ikke desto mindre antydede de markante fordele ved in vitro-undersøgelser, at analyse af interaktionen mellem en leukæmivirus og lymfoide cellekulturer kunne give værdifuld information om arten af leukæmiviruseffekter på immunresponser. Til dette formål er der nu udført en lang række eksperimenter ved anvendelse af in vitro-kulturer af normale og leukæmivirusinficerede splenocytter. Forringelse af antistofdannelse af splenocytter fra normale mus inficeret med FLV var ikke endelig, da sådanne splenocytter ikke reagerede på antigen, selv når de blev dyrket in vitro. I nylige eksperimenter har det imidlertid vist sig, at sådanne deprimerede cellekulturer kunne gendannes til normal eller næsten normal antistofresponsivitet ved stimulering med en række forskellige midler, herunder bakteriel LPS. Derudover gendannede Co-dyrkning af inficerede splenocytter med optimale antal peritoneale ekssudatceller rig på makrofager immunresponsivitet. Det syntes således plausibelt, at FLV-infektion kunne ændre makrofagfunktion eller-nummer, i det mindste med hensyn til lydhørhed over for SRBC.

det skal bemærkes, at miltceller fra inficerede dyr, når de blev tilsat i relativt lille antal til normale miltcellekulturer, resulterede i et deprimeret antistofrespons. En sådan undertrykkelse var tydelig selv med et forhold så lavt som 1:50 for splenocytter fra inficerede til normale donorer. Endvidere, selv når inficerede splenocytter blev adskilt fra normale miltceller af celleimpermeable membraner, forekom der stadig markeret immunsuppression. En sådan undertrykkelse kunne imidlertid blokeres ved tilsætning af anti-FLV-serum til begge kamre, hvilket indikerer, at serumet sandsynligvis forhindrede de inficerede celler i at frigive et middel over membranen, formodentlig en virus, eller kunne beskytte de normale målsplenocytter mod at blive ændret af materialet, der kommer over membranen. Afklarede cellefrie ekstrakter fra leukæmivirusinficerede splenocytter, når de tilsættes til normale miltceller, undertrykte også markant immunresponset.

de afklarede ekstrakter indeholdt infektiøs virus som vist ved passende in vivo-og in vitro-analyser. Antiserum til virussen forhindrede den undertrykkende virkning af de afklarede ekstrakter. I tidligere undersøgelser havde det imidlertid vist sig, at ikke-afklarede ekstrakter rig på virus ikke undertrykte det forventede immunrespons af normale miltcellekulturer in vitro. Det syntes sandsynligt, at de uklare ekstrakter ikke kun indeholdt infektiøs virus, men også ikke-infektiøs virus og snavs. Derfor blev der i yderligere undersøgelser tilsat små mængder afklarede ekstrakter til normale miltcellekulturer. Depression af immunresponset forekom ikke, selvom afklaret virus blev tilsat efterfølgende. Hvis de ikke-klargjorte cellefrie ekstrakter først blev udsat for ultracentrifugering, blev infektiøs virus adskilt, hvilket kunne undertrykke immunresponset, hvorimod den ikke-infektiøse pellet, der indeholder virusassocieret affald og formodentlig ikke-infektiøs virus, blokerede immunsuppression. Det forekommer således sandsynligt, at infektiøs virus i kultur kan konkurrere med ikke-infektiøs virus eller virusassocierede antigener om receptorer på immunocytter eller deres forstadier. Hvis dette er korrekt, forekommer det sandsynligt, at sådanne receptorer på immunocytter er ansvarlige for binding af infektiøs virus, som efter kontakt med immunocyten trænger ind og replikerer. Dette ville derefter resultere i enten inaktivering af cellens normale funktion eller forstyrrelse af cellens evne til at reagere på antigen. Fluorescerende mikroskopisk undersøgelse af splenocytkulturer inficeret med virus in vitro såvel som elektronmikroskopi understøtter denne opfattelse, da der forekommer markante ændringer i celler, som normalt bør forventes at udvise IG-og theta-overfladeantigener. Desuden steg antallet af lymfoide celler, der udviste FLV-antigen på deres overflade, in vitro efter infektion, samtidig med nedsat immunrespons over for SRBC. De ultrastrukturelle undersøgelser, især dem fra SEM, bekræftede den markante ændring af celletype både in vivo og in vitro. Udseendet af større glatte overflade lymfoide celler med markant ændrede overfladekarakteristika, herunder udseende af talrige overfladebleg, der har været relateret til steder med virusreplikation, var direkte relateret til infektion.

yderligere undersøgelser vedrørende interaktionen mellem leukæmivirus, især oprensede viruskomponenter i oncornavirus-komplekser, bør give yderligere information om, hvordan en virus reagerer med forskellige celletyper i immunresponssystemet. Sådanne undersøgelser bør være værdifulde ikke kun til analyse af arten af virusinduceret leukemogenese, men vil utvivlsomt fortsætte med at tilvejebringe et nyttigt værktøj til dissekering af forskellige parametre for immunresponsivitet.