Binding og backpressure egenskaper UNOsphere Q støtte:
en 5 mg/ml prøve AV BSA i 10 mMTris, pH8.5, ble lastet på en 1,1 x 20 cm kolonne. Rød, mottrykk; blå, 10% gjennombruddskapasitet.Programmer Fra forberedende separasjoner til polering

Kjører ved lave, middels eller høye strømningshastigheter

Dekker forskjellige analyttstørrelsesområder

Kompatibilitet med vanlige buffersystemer og salter

Matriser med enten sterke eller svake funksjonsgrupper

ulike matrisetyper, inkludert makroporøse og kontinuerlige ikke-porøse

Lavt tilbaketrykk

kompatibilitet med ulike utvalg viskositeter Og Driftstemperaturer

anion utveksling kolonne design

Ion utveksling kromatografi brukes til å skille ladede molekyler. I en anionutvekslingskolonne er pakningen positivt ladet og beholder derfor negativt ladede molekyler ved coulombisk interaksjon. De bundet molekylene elueres med en aniongradient. For molekyler med flere ladede grupper, for eksempel proteiner, er det den totale ladningen i en gitt bufferkjemi(pH, etc.) som bestemmer om og hvor sterkt molekylet vil binde seg til kolonnen stasjonær fase.

Anionbyttekromatografikolonner er tilgjengelige med matriser med enten sterke eller svake funksjonsgrupper. Den sterke anionutvekslingsmatrisen er kvaternær ammonium, og er betegnet Q. den svake anionutvekslingsmatrisen er dietylaminoetyl eller DEAE. En mellomstyrkeharpiks, som hovedsakelig inneholder tertiær med noen kvaternære aminer, er også tilgjengelig.

pH for bufferen i kolonnen bestemmer ladningen for hver av bestanddelene i en prøve. Ladningen av sterke anionbytterharpikser endres minimalt ved endring i pH og kan operere over et bredt pH-område. DEAE påvirkes mer av endringer i pH, med et vanlig driftsområde på pH 7-10.

tilgjengeligheten av et bredere pH-område med sterke anionbytterkolonner gir muligheten til å bruke pH for å endre nettoladningen til målmolekylene for å få dem til å binde seg sterkere, svakere eller ikke i det hele tatt. Kromatografi kan utføres i positiv modus, hvor målet (e) av interesse binder sterkt til kolonnen og (mange) andre molekyler ikke binder så sterkt. Negativ modus er vanlig i polering, hvor forurensninger binder seg til anionutvekslingskolonnen og målmolekylet ikke binder og holdes dermed ikke på kolonnen.

Eluering oppnås vanligvis med en saltgradient. De vanligste ionene ER PO43–, SO42–, COO– Og Cl–. Valg av anion avhenger av ønsket elueringsprofil og hvilke ioner som er kompatible med fremtidig rensing eller fremtidig bruk av analytten(e).

Anvendelser Av Anion Utveksling Kolonner

anion utveksling kolonner brukes mye for rensing av biomolekyler. Det er et bredt utvalg av kolonnetyper, størrelser og forskjellige styrker av funksjonelle grupper. Kombinert med optimaliserte bindings-og elueringsbetingelser kan anionutvekslingskolonnekromatografi brukes i alle stadier av biomolekylisolasjon og analyse, inkludert innledende opprydding, rensing, separasjon av analytter og fjerning av forurensninger som endotoksiner, vertscelleproteiner eller ioniske forbindelser.