Dyskusja i wnioski
komórki immunokompetentne i ich prekursory poddawane są złożonej serii zdarzeń, gdy są kwestionowane antygenem, tak aby rozmnażać się i albo syntetyzować przeciwciało, albo zaangażować się w komórkową odpowiedź immunologiczną. W przypadku zakażenia wirusem powszechnie przyjmuje się, że humoralna lub Komórkowa odporność na wirusa i antygeny związane z wirusem są wysoce ochronne, chociaż w niektórych przypadkach zmiany immunopatologiczne występują z powodu reakcji typu „autoimmunologicznego” na antygen wywołany wirusem na tkance docelowej. Jednak przeciwstawne typy interakcji wirusa z immunocytami, tj. depresja lub zmiana odpowiedzi immunologicznej, były znacznie mniej badane niż interakcje powodujące odporność antywirusową. W związku z tym wirusy białaczki myszy badano w ostatnich latach pod względem wpływu na odpowiedź immunologiczną (1-6). Staje się całkiem oczywiste, że wirusy białaczki mogą preferencyjnie wpływać na immunocyty i prekursory, odbiegając te komórki od szlaków normalnej odpowiedzi immunologicznej.
w opisywanych tutaj badaniach Kompleks wirusa białaczki Friend został wykorzystany do zbadania natury interakcji wirus-limfocyt, zarówno In vivo, jak i in vitro. Jednak badania in vivo cierpią z powodu problemów, że takie wirusy nie tylko mogą replikować się w tkance limfatycznej, ale oczywiście w innych tkankach. Ponadto, zmieniony wzór ruchu zakażonych komórek do narządów limfatycznych, jak również w obrębie narządów, dodaje dużą złożoność do analizy wpływu wirusa na immunocyty. Powszechnie uznaje się, że zakażone wirusem limfocyty mogą wykazywać nieprawidłową zdolność naprowadzania, tak że normalny wzór ruchu jest zakłócony (17,18). Może to wyjaśnić główne zmiany w architekturze narządów limfatycznych zwierząt zakażonych wirusem białaczki. Ponadto, zakażenie wirusowe per se może wywoływać antygeny, które są „obce” dla normalnych i jeszcze nie dotkniętych komórek limfatycznych, które następnie mogą reagować w sposób szkodliwy dla zakażonych limfocytów. Tak więc” autoimmunologiczna ” zmiana typu może wystąpić z powodu infekcji wirusowej in vivo. Niemniej jednak, badania w tym laboratorium, jak również inne wykazały wyraźnie, że wrażliwe szczepy myszy zakażonych wirusem białaczki wykazują znacznie obniżoną odpowiedź przeciwciał na antygeny zależne od T, takie jak SRBC. W innych badaniach wykazano immunosupresję do antygenów zależnych od T. Ponadto odporność komórkowa przejawia się w reakcji na antygeny mykobakteryjne, alloantygeny itp., może być również znacznie przygnębiony u zwierząt zakażonych onkornawirusem.
chociaż niektórzy badacze uważali wcześniej, że taka obniżona odpowiedź immunologiczna może odzwierciedlać „przemieszczenie” normalnych immunocytów przez przekształcone komórki białaczkowe, badania kinetyczne wykazały, że depresja odporności rozwija się na długo przed wyraźnymi zmianami architektury komórek limfatycznych lub objawami choroby. Wydaje się prawdopodobne, że wirus może infekować komórki B lub ich prekursory i odbierać je od normalnego szlaku reakcji immunologicznej. Szereg badań sugeruje, że komórki prekursorowe przeciwciała mogą być preferencyjnym celem dla MuLV i że po wystąpieniu infekcji wirusowej takie immunocyty nie są już kompetentne do odpowiedzi na antygen i przechodzą transformację w komórkę immunokompetentną. Różne badania transferu komórek wspierały ten pogląd, ponieważ zdolność komórek limfatycznych do montowania odpowiedzi immunologicznej u napromieniowanych myszy biorców była znacznie zmniejszona, gdy zwierzęta dawcy były wcześniej zakażone wirusem. Nie wydaje się prawdopodobne, aby wirus został przeniesiony do biorców, zwłaszcza że różne kontrole wykazały, że wirus FLV nie replikuje się dobrze u napromieniowanych biorców.
badania ultrastrukturalne z zakażoną śledzioną potwierdziły pogląd, że prekursorowe komórki immunokompetentne były głównie dotknięte infekcją wirusową. Niemniej jednak, znaczące zalety badań in vitro sugerują, że analiza interakcji wirusa białaczki z kulturami komórek limfatycznych może dostarczyć cennych informacji na temat charakteru wpływu wirusa białaczki na odpowiedzi immunologiczne. W tym celu przeprowadzono szeroką gamę eksperymentów z wykorzystaniem hodowli in vitro splenocytów zakażonych wirusem normalnym i białaczkowym. Upośledzenie tworzenia przeciwciał przez splenocyty od normalnych myszy zakażonych FLV nie było ograniczone w naturze, ponieważ takie splenocyty nie reagowały na antygen nawet podczas hodowli in vitro. Jednakże w ostatnich eksperymentach stwierdzono, że takie Kultury komórkowe przygnębione mogą zostać przywrócone do normalnej lub zbliżonej do normalnej reakcji na przeciwciała poprzez stymulację różnymi środkami, w tym bakteryjnymi LPS. Ponadto współwystępowanie zakażonych splenocytów z optymalną liczbą komórek wysięku otrzewnowego bogatych w makrofagi przywróciło odpowiedź immunologiczną. W związku z tym wydaje się prawdopodobne, że zakażenie FLV może zmieniać funkcję lub liczbę makrofagów, przynajmniej pod względem odpowiedzi na SRBC.
należy zauważyć, że komórki śledziony zakażonych zwierząt, po dodaniu w stosunkowo małych ilościach do normalnych hodowli komórek śledziony, powodowały obniżoną odpowiedź przeciwciał. Taka supresja była widoczna nawet przy stosunku tak niskim, jak 1:50 dla splenocytów od zakażonych do zdrowych dawców. Ponadto, nawet gdy zakażone splenocyty zostały oddzielone od normalnych komórek śledziony przez nieprzepuszczalne błony komórkowe oznaczone immunosupresja nadal występował. Taka supresja może być jednak zablokowana przez dodanie surowicy anty-FLV do obu komór, co wskazuje, że surowica prawdopodobnie uniemożliwiła zakażonym komórkom uwolnienie czynnika przez błonę, przypuszczalnie wirusa, lub mogłaby chronić normalne docelowe splenocyty przed zmianą przez materiał przechodzący przez błonę. Klarowane ekstrakty wolne od komórek z wirusa białaczki zakażonych splenocytów, po dodaniu do normalnych komórek śledziony, również znacznie tłumione odpowiedź immunologiczną.
klarowane ekstrakty zawierały wirus zakaźny, co wykazano za pomocą odpowiednich testów in vivo i in vitro. Antysurowica wirusa zapobiegła hamującemu działaniu klarowanych ekstraktów. W poprzednich badaniach stwierdzono jednak, że nieklaryfikowane ekstrakty bogate w wirusa nie tłumią oczekiwanej odpowiedzi immunologicznej w normalnych kulturach komórek śledziony in vitro. Wydawało się prawdopodobne, że nieklaryfikowane ekstrakty zawierały nie tylko zakaźnego wirusa, ale także niezakaźnego wirusa i gruzu. Dlatego w dodatkowych badaniach do prawidłowych hodowli komórek śledziony dodawano niewielkie ilości klarowanych ekstraktów. Zahamowanie odpowiedzi immunologicznej nie wystąpiło, nawet jeśli później dodano wyjaśniony wirus. Jeśli jednak nieklaryfikowane ekstrakty wolne od komórek zostały najpierw poddane ultracentryfugacji, wirus zakaźny został oddzielony, co może tłumić odpowiedź immunologiczną, podczas gdy niezakaźny granulat, zawierający zanieczyszczenia związane z wirusem i przypuszczalnie niezakaźny wirus, zablokował immunosupresję. Wydaje się zatem prawdopodobne, że w hodowli wirus zakaźny może konkurować z niezakaźnym wirusem lub antygenami związanymi z wirusem o receptory na immunocytach lub ich prekursorach. Jeśli jest to prawidłowe, wydaje się prawdopodobne, że takie receptory na immunocytach są odpowiedzialne za Wiązanie zakaźnego wirusa, który po kontakcie z immunocytem przenika i replikuje. Spowoduje to albo inaktywację normalnej funkcji komórki, albo zakłócenie zdolności komórki do odpowiedzi na antygen. Fluorescencyjne badanie mikroskopowe hodowli splenocytów zakażonych wirusem in vitro, jak również mikroskopia elektronowa, potwierdzają ten pogląd, ponieważ w komórkach występują znaczne zmiany, które normalnie powinny wykazywać antygeny powierzchniowe Ig i Teta. Ponadto liczba komórek limfoidalnych wykazujących antygen FLV na ich powierzchni zwiększyła się in vitro po zakażeniu, łącznie z zaburzeniem odpowiedzi immunologicznej na SRBC. Badania ultrastrukturalne, zwłaszcza te prowadzone przez SEM, potwierdziły znaczną zmianę typu komórek zarówno In vivo, jak i in vitro. Pojawienie się większych komórek limfatycznych o gładkiej powierzchni o znacznie zmienionych właściwościach powierzchni, w tym pojawienie się licznych pęcherzyków powierzchniowych, które były związane z miejscami replikacji wirusa, było bezpośrednio związane z zakażeniem.
dalsze badania dotyczące interakcji między wirusami białaczki, zwłaszcza oczyszczonymi składnikami wirusowymi kompleksów oncornawirusowych, powinny dostarczyć dodatkowych informacji o tym, jak wirus reaguje z różnymi typami komórek układu odpowiedzi immunologicznej. Takie badania powinny być cenne nie tylko do analizy charakteru leukemogenezy wywołanej wirusem, ale niewątpliwie nadal stanowić użyteczne narzędzie do sekcji różnych parametrów odpowiedzi immunologicznej.