proliferacja komórek B
proliferacja komórek jest jednym z wcześniejszych zdarzeń aktywacji komórek B, które jest niezbędne do rozszerzenia puli aktywowanych antygenem komórek B i zapewnienia wystarczającego poziomu odpowiedzi immunologicznej. Proliferację limfocytów B można wywołać in vitro na wiele sposobów. Zaangażowanie BCR służy jako bodziec pierwotny, ale ponadto kilka cząsteczek kostymulujących lub receptorów pomocniczych, takich jak CD38, CD40 i CD19, może bezpośrednio stymulować proliferację komórek B lub zmniejszać próg aktywacji komórek B przez antygeny(Barrington i in., 2009; Chen i Ross, 2005, 2007). Agoniści receptora Toll-like (TLR), tacy jak LPS i DNA CpG, są multipotentnymi mitogenami, które stymulują poliklonalną proliferację komórek B przez odpowiednio TLRs 4 i 9 (Hoshino et al., 1999; Krieg et al., 1995). Ostatnio wykazano, że grupa antygenów glikolipidowych może stymulować proliferację komórek B poprzez cząsteczkę MHC klasy i-podobną do CD1D, obecną na niektórych komórkach B (Brigl and Brenner, 2010; Lang et al., 2008), a także komórki mieloidalne. Prototypowym i najczęściej badanym antygenem CD1d jest Alfa-galaktozyloceramid, lipid wyekstrahowany z gąbki morskiej; jednak endogenne antygeny glikolipidowe komórek ssaków również aktywują CD1d(Zhou i wsp ., 2004).
RA odgrywa różne role w regulacji aktywacji i różnicowania komórek B poprzez jego wpływ na te wewnętrzne systemy sygnalizacji. Kilka linii dowodów wykazało, że regulacja proliferacji limfocytów B przez RZS zależy od Natury napotkanego bodźca. Na poziomie fizjologicznym (Około 5-20 nM) RA hamował szybkość proliferacji oczyszczonych ludzkich komórek B krwi obwodowej stymulowanych przez przeciwciało anty-μ (Blomhoff i wsp ., 1992). W mysich wcześniej nieleczonych komórkach B stymulowanych anty-μ do inicjowania sygnalizacji BCR i anty-CD38 do ligacji cząsteczki CD38 na powierzchni komórek B, proliferacja była zmniejszona w populacji jako całości, ale z czasem pojawiła się grupa większych rozmiarów, mniej cyklicznych i bardziej zróżnicowanych komórek B, a komórki te wykazywały większą powierzchnię(S) Ig, co wskazuje na zwiększoną progresję w kierunku stania się PCs wydzielającymi przeciwciała (Chen i Ross, 2005). W modelu in vitro aktywacji limfocytów B zależnej od komórek T, RZS zmniejszał proliferację limfocytów B indukowaną przez ligację BCR i CD40 oraz przez LPS (Chen i Ross, 2005, 2007). Zmniejszenie proliferacji komórek B przez RZS w Warunkach różnych bodźców sugeruje udział wspólnego szlaku prowadzącego do negatywnej regulacji cyklu komórkowego i wzrostu, gdy komórki B są stymulowane przez sieciowanie receptorów związanych z BCR i TLR4. Naderi i Blomhoff (1999) wykazali, że zmniejszenie proliferacji komórek B W normalnych ludzkich obwodowych komórkach B było poprzedzone zatrzymaniem cyklu komórkowego, o czym świadczy zmieniona ekspresja kilku czynników regulacyjnych cyklu komórkowego. Negatywna Regulacja szlaku NF-kB może również przyczynić się do hamującego wpływu RZS na proliferację komórek, ponieważ członkowie rodziny NF-kB odgrywają główną rolę w kontrolowaniu rozwoju i proliferacji komórek B (Chen et al., 2002; Siebenlist et al., 2005). Badania linii komórek limfoidalnych B w hodowli wykazały również, że RA hamuje proliferację poprzez blokowanie zjonizowanego kanału wapniowego, który pośredniczy we wczesnej odpowiedzi wapniowej po ligacji BCR (Bosma and Sidell, 1988).
w przeciwieństwie do hamującego wpływu RZS na proliferację komórek B stymulowaną przez ligację BCR i LPS, jak omówiono powyżej, RZS zwiększył proliferację komórek B pamięci, gdy komórki B były stymulowane DNA CpG, co indukuje aktywację komórek przez TLR9 (Ertesvag et al., 2007). Zwiększonej szybkości proliferacji limfocytów B towarzyszyło zwiększone wydzielanie przeciwciał. W badaniu mechanistycznym, Ertesvag et al. (2007) wykazał, że zwiększona proliferacja i różnicowanie przez RZS odpowiadały aktywacji szlaku p38 MAPK, która doprowadziła do fosforylacji białek siatkówki i zwiększyła poziom cykliny D, czynników stymulujących progresję cyklu komórkowego. Zaobserwowaliśmy również, że RZS zwiększa proliferację oczyszczonych komórek B śledziony mysiej stymulowanych przez α-galaktozyloceramid, ligand receptora CD1d, który był skorelowany z różnicowaniem komórek B, czego dowodem jest ekspresja sIgG1 i CD138 (Q. Chen, niepublikowane dane), podczas gdy w tym samym czasie RZS zmniejszał proliferację identycznych komórek B stymulowanych przez LPS.
te kontrastujące wyniki sugerują, że RZS wpływa na proliferację limfocytów B w różny sposób, w zależności od subpopulacji limfocytów B, jak również od bodźca. Podczas gdy RA hamuje proliferację dojrzałych komórek B, co może ułatwić ich różnicowanie aktywowanych komórek B w kierunku PCs, RA promuje ekspansję podzbioru komórek B, które ulegają dalszemu różnicowaniu (Chen i Ross, 2005), oba procesy prowadzące do promowania produkcji przeciwciał. Dodatkowo, podczas gdy fizjologiczne poziomy RZS hamowały proliferację limfocytów B, RZS w tym samym stężeniu zapobiegał również samoistnej apoptozie limfocytów B(Lomo i wsp ., 1998), co dodatkowo sugeruje, że chociaż RZS hamuje dojrzałą proliferację komórek B, działa w celu utrzymania funkcjonalnej puli komórek B, wymaganej do skutecznej odpowiedzi pamięciowej. Potrzebne są dalsze badania, aby lepiej określić, czy to etap aktywacji komórek B per se (naiwność lub pamięć) lub sam bodziec, lub oba te czynniki, decyduje o tym, czy RZS Promuje lub hamuje cykle i proliferację komórek B.