14, 4 LPL terapia genética
LPL é uma das principais enzimas no metabolismo da TRL, especialmente partículas CM contendo apoB-48. A LPL é produzida em tecido adiposo, músculo esquelético e músculo cardíaco. Activada pelo seu cofactor apoC-II , a LPL medeia a hidrólise de TG em CM e VLDL no lado luminal do endotélio. Os FFA gerados são posteriormente utilizados para a produção de energia em músculo ou armazenados como gordura na adipose. A LPL também contribui para a reserva de HDL por eliminação de fosfolípidos e apolipoproteínas durante a hidrólise da lipoproteína . Para além da sua actividade enzimática, a LPL também aumenta a depuração hepática da TRL, facilitando a captação mediada pelos receptores de partículas aterogénicas de lipoproteína . Através destas acções, a LPL exerce efeitos antiaterogénicos. De notar que a LPL subendotelialmente localizada tem um efeito proaterogénico que aumenta a susceptibilidade oxidativa das LDL, facilitando a captação de TRL pelos macrófagos . Este último promove a formação de células de espuma ,uma marca de aterogênese.
em vista destes efeitos heterogêneos, o papel exato de LPL na aterogênese ainda é uma questão de debate . O delicado equilíbrio entre LPL Pro – e antiatherogênica parece depender de sua localização . O desenvolvimento de terapia genética é provável para pacientes com deficiência de LPL por uma série de razões . Estes doentes carecem actualmente de agentes farmacológicos eficazes. Diagnóstico de deficiência genética LPL pode ser feito com precisão. O gene LPL é bastante pequeno, o que permite a sua incorporação em uma ampla gama de vetores virais. Existem modelos animais disponíveis (ratinhos com deficiência em LPL” knock-out ” e gatinhos com deficiência em LPL). A LPL é produzida naturalmente no músculo esquelético. Este tecido é facilmente atingido através de injecção intramuscular e pode ser alvo de vectores com um tropismo natural para este músculo esquelético. A maioria dos doentes apresenta LPL detectável mas inactivo na circulação. Isto diminui fortemente o risco de uma resposta imunitária significativa contra a LPL transgénica. Por último, o aumento da actividade da LPL na circulação humana só foi associado a efeitos benéficos. Não só o aumento da actividade da LPL resulta numa redução significativa do TG em jejum e pós-prandial, como também provavelmente aumentou o colesterol HDL anti -atherogénico.a eficácia da terapêutica do gene LPL com adenovírus foi estabelecida há muito tempo em modelos animais de elevada quilomicronemia e hipertrigliceridemia . Uma vez que a duração da expressão do transgeno sobre a infecção adenoviral é limitada, o vírus adeno-associado não-patológico (AAV) tem sido usado em vários estudos de terapia genética em homens . Como transgeno, a variante lpls447x (lpls447x) de ocorrência natural demonstrou apresentar um efeito benéfico no perfil lipídico com uma diminuição concomitante do risco de DCV .Nierman et al. relatou a implementação bem sucedida da terapia genética LPL usando um vetor AAV1-LPLS447X em modelos murinos e felinos de deficiência LPL. Eles demonstraram que miócitos cultivados de pacientes com deficiência de LPL eram capazes de produzir e segregar LPL cataliticamente ativo. Estes resultados promissores levaram ao primeiro ensaio de terapia genética LPL humana proposto nos Países Baixos. Enquanto se aguarda a sua iniciação, os primeiros seis doentes com deficiência de LPL com quilomicronemia foram cuidadosamente investigados .
Todos os doentes foram caracterizados por TG> 10 mmol/L apesar do cumprimento da restrição dietética. Além disso, todos os doentes sofriam de pancreatite recorrente. Os doentes mostraram perda total da actividade enzimática da LPL, enquanto que a proteína inactiva circulante da LPL pôde ser demonstrada na totalidade (19-103% do normal). Outras populações de doentes que podem beneficiar da terapêutica com o gene LPL incluem doentes com deficiência em heterozigoto LPL com o fenótipo clínico da síndrome de chylomicronemia, doentes com hipertrigliceridemia resistente à terapêutica e doentes com hipertrigliceridemia anteriormente caracterizada como hiperlipidemia do tipo V (Fredrickson). Após a administração de alipogene tiparvovec, o conteúdo de TG da fracção CM e o rácio CM-TG/TG plasmático total foram reduzidos ao longo do período pós-prandial. O nível do pico pós-prandial CM(3)H e a área CM(3)h sob a curva foram significativamente reduzidos (79% e 93%, 6 e 24 h após a refeição de teste, respectivamente). Não houve alterações significativas nas taxas de aparecimento de NFA plasmática e glicerol. A glucose plasmática, a insulina e o peptídeo-C também não se alteraram. A administração Intramuscular de alipogene tiparvovec resultou numa melhoria significativa do metabolismo da CM pós-prandial em doentes com DPLL sem induzir um grande fluxo de NFA pós-prandial. A administração Intramuscular de AAV1-LPLS447X foi geralmente bem tolerada e foi associada a redução na incidência global de pancreatite e melhoria clínica até 2 anos após a administração.
Em resumo, os resultados de estudos intervencionistas, sugeriu que os marcadores do metabolismo pós-prandial, tais como a apoB-48 poderiam ser mais precisas do que jejuaram plasmáticas de TG para monitorar o efeito de AAV1-LPLS447X. O benefício geral-taxa de risco de AAV1-LPLS447X terapia genética parece positiva, particularmente para aqueles com maior risco de complicações .