diskussion och slutsats

immunokompetenta celler och deras prekursorer genomgår en komplex serie händelser när de utmanas med ett antigen för att proliferera och antingen syntetisera antikropp eller bli involverad i cellulära immunsvar. Vid virusinfektion har det allmänt accepterats att humoral eller cellmedierad immunitet mot viruset och virusassocierade antigener är mycket skyddande, även om immunopatologiska lesioner i vissa fall uppstår på grund av ett ”autoimmunt” typrespons på det virusinducerade antigenet på målvävnad. De kontrasterande typerna av interaktion mellan ett virus och immunocyter, dvs depression eller förändring av immunsvar, har emellertid studerats mycket mindre än interaktionerna som resulterar i antivirusimmunitet. I detta avseende har murina leukemivirus studerats de senaste åren när det gäller effekter på immunsvar (1-6). Det blir ganska uppenbart att leukemivirus företrädesvis kan påverka immunocyter och prekursorer, vilket avviker från dessa celler från vägarna för normal immunrespons.

i de studier som beskrivs här användes Vänleukemiviruskomplexet för att undersöka arten av virus-lymfocytinteraktioner, både in vivo och in vitro. In vivo-studier lider emellertid av de problem som sådana virus inte bara kan replikera i lymfoid vävnad utan uppenbarligen i andra vävnader. Dessutom, det förändrade trafikmönstret för infekterade celler till lymfoida organ, såväl som inom organen, lägger till en stor komplexitet för analys av virusets effekter på immunocyter. Det är allmänt erkänt att virusinfekterade lymfocyter kan visa onormal homing förmåga, så att det normala trafikmönstret störs (17,18). Detta kan förklara de stora förändringarna i arkitekturen hos lymfoida organ av leukemivirusinfekterade djur. Vidare kan virusinfektion i sig inducera antigener som är” främmande ” för normala och ännu inte drabbade lymfoida celler som sedan kan reagera på ett skadligt sätt på de infekterade lymfocyterna. Således kan en” autoimmun ” typskada uppstå på grund av virusinfektion in vivo. Icke desto mindre har studier i detta laboratorium såväl som andra visat tydligt att mottagliga stammar av möss infekterade med ett leukemivirus visar markant deprimerad antikroppssvar mot T-beroende antigener såsom SRBC. I andra studier har immunsuppression mot T-beroende antigener visats. Dessutom, cellulär immunitet som framgår av lyhördhet för mykobakteriella antigener, alloantigener, etc., kan också vara markant deprimerad hos oncornavirusinfekterade djur.

även om det tidigare kändes av vissa utredare att sådan deprimerad immunrespons kan återspegla ”förskjutning” av normala immunocyter genom transformerade leukemiska celler, visade kinetiska studier att depression av immunitet utvecklas långt innan markerade förändringar av lymfoidcellarkitektur eller symtom på sjukdom blir uppenbara. Det verkar troligt att virus kan infektera B-celler eller deras prekursorer och avvika dem från den normala vägen för immunrespons. Ett antal studier har föreslagit att antikroppsprekursorcellerna kan vara ett förmånsmål för MuLV och att när virusinfektion inträffar är sådana immunocyter inte längre kompetenta att svara på antigen och genomgå omvandling till en immunkompetent cell. Olika cellöverföringsstudier stödde denna uppfattning, eftersom lymfoida cellers förmåga att montera ett immunsvar i bestrålade mottagarmöss minskade markant när givardjuren tidigare infekterades med viruset. Det verkade inte troligt att virus överfördes till mottagarna, särskilt eftersom olika kontroller visade att FLV-virus inte replikerade bra i bestrålade mottagare.

ultrastrukturella studier med infekterade mjältar stödde uppfattningen att prekursorimmunkompetenta celler huvudsakligen påverkades av virusinfektion. Icke desto mindre föreslog de markerade fördelarna med in vitro-studier att analys av interaktionen mellan ett leukemivirus och lymfoida cellkulturer kan ge värdefull information om arten av leukemiviruseffekter på immunsvar. För detta ändamål har en mängd olika experiment nu utförts med användning av in vitro-kulturer av normala och leukemivirusinfekterade splenocyter. Försämring av antikroppsbildning av splenocyter från normala möss infekterade med FLV var inte begränsad till sin natur eftersom sådana splenocyter inte svarade på antigen även när de odlades in vitro. Men i de senaste experimenten har det visat sig att sådana deprimerade cellkulturer kan återställas till normal eller nära normal antikroppssvar genom stimulering med en mängd olika medel, inklusive bakteriell LPS. Dessutom återställde samodling av infekterade splenocyter med optimalt antal peritoneala exsudatceller rik på makrofager immunrespons. Således verkade det troligt att FLV-infektion kunde förändra makrofagfunktionen eller antalet, åtminstone när det gäller lyhördhet för SRBC.

det bör noteras att mjältceller från infekterade djur, när de tillsattes i relativt litet antal till normala mjältcellkulturer, resulterade i ett deprimerat antikroppssvar. Sådan undertryckning var uppenbar även med ett förhållande så lågt som 1:50 för splenocyter från infekterade till normala givare. Dessutom, även när infekterade splenocyter separerades från normala mjältceller genom cell ogenomträngliga membran markerade immunsuppression fortfarande inträffade. Sådan undertryckning kan emellertid blockeras genom tillsats av anti-FLV-serum till endera kammaren, vilket indikerar att serumet förmodligen hindrade de infekterade cellerna från att frigöra ett medel över membranet, förmodligen ett virus, eller kunde skydda de normala målsplenocyterna från att förändras av materialet som kommer över membranet. Klarade cellfria extrakt från leukemivirusinfekterade splenocyter, när de tillsattes till normala mjältceller, undertryckte också markant immunsvaret.

de klargjorda extrakten innehöll infektiöst virus, vilket framgår av lämpliga in vivo-och in vitro-analyser. Antiserum mot viruset förhindrade den undertryckande effekten av de klarade extrakten. I tidigare studier hade det emellertid visat sig att oklarifierade extrakt rik på virus inte undertryckte det förväntade immunsvaret hos normala mjältcellkulturer in vitro. Det verkade troligt att de oklarifierade extrakten inte bara innehöll infektiöst virus utan också icke-infektiöst virus och skräp. Därför tillsattes i ytterligare studier små mängder klarade extrakt till normala mjältcellkulturer. Depression av immunsvaret inträffade inte, även om klarat virus tillsattes därefter. Om emellertid de oklarifierade cellfria extrakten först utsattes för ultracentrifugering separerades infektiöst virus som kunde undertrycka immunsvaret, medan den icke-infektiösa pelleten, innehållande virusassocierat skräp och förmodligen icke-infektiöst virus, blockerade immunsuppression. Således verkar det troligt att infektionsvirus i kultur kan konkurrera med icke-infektiöst virus eller virusassocierade antigener för receptorer på immunocyter eller deras prekursorer. Om detta är korrekt verkar det troligt att sådana receptorer på immunocyter är ansvariga för att binda infektiöst virus som efter kontakt med immunocyten penetrerar och replikerar. Detta skulle då resultera i antingen inaktivering av cellens normala funktion eller störning av cellens förmåga att svara på antigen. Fluorescerande mikroskopisk undersökning av splenocytkulturer infekterade med virus in vitro, såväl som elektronmikroskopi, stöder denna uppfattning eftersom markerade förändringar uppträder i celler som normalt bör förväntas evince ig och theta ytantigener. Dessutom ökade antalet lymfoida celler som uppvisade FLV-antigen på deras yta in vitro efter infektion, samtidigt med nedsatt immunrespons mot SRBC. De ultrastrukturella studierna, särskilt de av SEM, bekräftade den markerade förändringen av celltyp både in vivo och in vitro. Utseendet på större släta lymfoida celler med markant förändrade ytegenskaper, inklusive utseende av många ytbleber som har varit relaterade till platser för virusreplikation, var direkt relaterat till infektion.

ytterligare studier avseende interaktionen mellan leukemivirus, särskilt renade viruskomponenter i oncornaviruskomplex, bör ge ytterligare information om hur ett virus reagerar med olika celltyper i immunsvarssystemet. Sådana studier bör vara värdefulla inte bara för att analysera arten av virusinducerad leukemogenes, men kommer utan tvekan att fortsätta att ge ett användbart verktyg för att dissekera olika parametrar för immunrespons.