Abstrakt

introduktion. Haptoglobin binder globindelen av fritt hemoglobin. Serumhaptoglobinmätning används som laboratoriemarkör för diagnos av hemolytisk anemi. Eftersom lagrat blod innehåller fritt hemoglobin kan transfusion påverka haptoglobinnivåerna. Studiens Mål. Syftet med studien var att utvärdera om serumhaptoglobin kunde mätas för att bedöma hemolys hos nyligen transfuserade patienter. Patienter och metoder. Tjugoen patienter, som fick mer än en enhet packade röda blodkroppar (PRBC) för förmodade icke-hemolytiska indikationer, registrerades. Haptoglobinnivåer i Serum registrerades före, omedelbart efter och 24 och 48 timmar efter transfusion. Observationer och resultat. Variansanalys med upprepade åtgärder användes för att undersöka serumhaptoglobinnivåerna vid olika tidsperioder och ingen signifikant skillnad hittades (). Slutsats. Resultaten tyder på att serum haptoglobin kan användas vid diagnos av hemolys hos patienter som får flera enheter av PRBC.

1. Inledning

Haptoglobin, ett alfa2-globulin, som fungerar för att binda globindelen av fritt hemoglobin i blodet, är en akutfasreaktant. Halveringstiden för serumhaptoglobin är ungefär fem dagar, men i närvaro av fritt hemoglobin (t.ex. intravaskulär hemolys) rensas hemoglobin-haptoglobinkomplexet som bildas snabbt från serumet av monocyt-makrofagsystemet med resulterande serumhaptoglobinnivåer som är låga eller frånvarande. Hemoglobin-haptoglobinkomplexet förhindrar också renal tubulär skada genom att hämma hemoglobinflykt genom glomerulus . Således orsakar en ökad belastning av fritt plasmahemoglobin snabbt en markant minskning av uppmätt serumhaptoglobin (normala nivåer 36-195 mg/dL).

mätningen av serumhaptoglobin används som en av laboratoriemarkörerna för diagnos av hemolytisk anemi. Studier har visat effekten av långvarig lagring på mängden fritt hemoglobin i det lagrade blodet. Nishiyama tittade på effekten av blodtransfusion på haptoglobin och fritt hemoglobin. Författaren noterade att när åldern för lagrat blod ökade detektionshastigheten för fritt hemoglobin gick också upp .

i denna studie registrerade vi haptoglobinnivåerna före och efter transfusion hos patienter som fick flera blodtransfusioner för förmodad icke-hemolytisk anemi för att se om flera transfusioner sänkte haptoglobinvärdena tillräckligt för att negera dess användbarhet vid diagnos av hemolytisk anemi hos transfuserade patienter.

2. Studiemål

syftet med studien var att utvärdera om serumhaptoglobin kunde mätas för att bedöma hemolys hos nyligen transfuserade patienter.

3. Metoder

3.1. Patienter

patienter för vilka en typ-och cross-match-begäran om två eller flera enheter av PRBC-transfusion gjordes från September 2007 till juni 2008 identifierades från Blodbanken vid Staten Island University Hospital. Av dessa kontaktades patienterna som var arton år eller äldre för inskrivning i studien. Patienter med en historia av blodtransfusion under de senaste fyra månaderna, historia av hjärtventilersättning, bevis på hepatomegali, splenomegali och/ eller icterus vid fysisk undersökning, de med onormala leverfunktionstester eller av något annat bevis på hemolys vid tidpunkten för inskrivning i studien uteslöts. Skriftligt informerat samtycke för deltagande i studien och för blodtransfusion erhölls. Patienterna kunde när som helst dra sig ur studien. Varje patient som utvecklade tecken på hemolys under studieperioden avlägsnades och serumhaptoglobinnivåerna användes inte i statistisk analys.

3.2. Förfarande

När informerat samtycke erhölls och en lämplig indikation för blodtransfusion dokumenterades erhölls blodprover från patienterna med en perifer venipunktur, som utfördes med bibehållande av aseptisk teknik. Serumhaptoglobinnivåerna mättes fyra gånger för varje patient: en gång före den första transfusionen och tre gånger efter den sista transfusionen (omedelbart posttransfusion och tjugofyra och fyrtioåtta timmar efter transfusion). Dessa tider bestämdes baserat på halveringstiden för haptoglobin och hemoglobin-haptoglobinkomplexet. För pretransfusionsmätningen av serumhaptoglobin användes provet för typ och korsmatch så ofta som möjligt för att undvika ytterligare venipunkturer. Åldern för varje enhet av packade röda blodkroppar transfusion registrerades också.

3.3. PRBC-Transfusion

PRBC-transfusionen utfördes av sjuksköterskan som vårdade patienten enligt rekommenderade riktlinjer. PRBC: erna erhölls från sjukhusets blodbank. Konserveringsmedlet som användes i PRBC: erna var CPD (citratfosfatdextros). De transfuserade enheterna identifierades efter lämplig typ och korsmatchning i Blodbanken. Studiens utredare var inte inblandade i urval eller transfusion av PRBC: erna.

3.4. Mätning av Serumhaptoglobin

serumhaptoglobinnivåerna mättes i sjukhuslaboratoriet med hjälp av en Beckmen Coulter Unicel DXC genom att kombinera en antihaptoglobinantikropp med haptoglobinmolekylen och bilda ett olösligt komplex. Detta antigen-antikroppskomplex mättes med optisk absorbans vid 340 nanometer med turbidimetriprincip . Serumhaptoglobin rapporterades i milligram per deciliter. Det normala intervallet av serumhaptoglobin i vårt sjukhuslaboratorium är 36-195 mg / dL.

3,5. Statistik

vi använde variansanalys med ett upprepat mått för att undersöka gruppskillnader i serumhaptoglobinnivåer över de olika tidsintervallen. Univariat parat test användes för att undersöka skillnader från pretransfusion till posttransfusion haptoglobinnivåer. Fisher Exact användes för kategoriska data. Statistisk signifikans sattes till mindre än eller lika med 0,05. Data undersöktes med hjälp av Number Cruncher Statistical System (2004). Provstorleken på tjugoen patienter mätt fyra gånger med de upprepade måtten ANOVA beräknades baserat på en måttlig effektstorlek på 0,2.

4. Observationer och resultat

totalt tjugo patienter fick fyrtiosju enheter PRBC. Den vanligaste indikationen för transfusion var akut blodförlust för gastrointestinal blödning hos femton patienter, varav elva patienter hade hemorrhoidblödning och fyra patienter hade en oidentifierad gastrointestinal blödningskälla. Tre patienter hade kraftig menstruationsblödning från livmoderfibrer, en patient var inblandad i en motorfordonsolycka som resulterade i massiv blodförlust och två patienter togs in på intensivvårdsavdelningen med akut andningssvikt från aspirationspneumoni. Även om serumhaptoglobinnivåer kan ökas under inflammatoriska tillstånd, av de två patienterna i vår studie som antogs med akut andningsfel noterades inte heller att de hade onormalt förhöjda serumhaptoglobinnivåer vid baslinjen.

för de tjugoen patienterna undersöktes serumhaptoglobinnivåer som togs vid pretransfusion, omedelbart efter, 24 timmar och fyrtioåtta timmar efter transfusion för signifikanta skillnader med användning av variansanalys med upprepade åtgärder. Inga signifikanta skillnader hittades efter justering med växthus-Geissers uppskattning,,,.

Figur 1 och Tabell 1 visar haptoglobinnivåerna för alla tjugoen patienter vid olika tidsintervaller. Tabell 2 visar medelvärdet, standardavvikelsen och medelskillnaderna i haptoglobinnivåer vid varje tidsintervall. Skillnaderna undersöktes med användning av univariat parat test med endast en signifikant skillnad som hittades från pretransfusionshaptoglobinnivåer till haptoglobinnivåerna omedelbart efter transfusion (, tvåsidig).

Figur 1

haptoglobinnivåer för de 21 patienterna vid olika tidsintervall.

hos de tjugoen patienterna var haptoglobinnivåerna före transfusion alla inom det normala intervallet. Omedelbart efter transfusion hade tre patienter nivåer under normala och två av dessa patienter hade en ihållande minskning av haptoglobinnivåerna vid 24 och 48 timmar. Dessutom hade en patient en minskning av serumhaptoglobinnivån vid 24 timmar och en vid 48 timmar. Båda dessa patienter hade normala nivåer vid andra tidsperioder.

vi noterade också att totalt fyra patienter fick blod större än 30 dagar gammalt. Av dessa hade 2 haptoglobinnivåer mindre än 36 mg/dL 48 timmar efter transfusion. Detta var inte statistiskt signifikant vid, Fisher exakt.

Vi observerade också att tre patienter med lågt normalt haptoglobin vid baslinjen (mindre än 60 mg/dL) hade en nivå mindre än 36 mg/dL vid 48 timmar. Ingen patient med en nivå över 60 mg/dL före transfusion hade en onormal nivå på mindre än 36 mg / dL vid 48 timmar. Detta var betydande på, Fisher exakt.

vår studie var inte driven för att titta på effekten av massiva mängder PRBC-transfusion på serumhaptoglobinnivåer. Vi noterade dock att av de tre patienterna som fick mer än två enheter av PRBC hade endast en en posttransfusionsnivå som var under normal och denna droppe sågs vid 48 timmar efter transfusion. Denna patient hade fått fyra enheter PRBC som alla var mer än 30 dagar gamla.

5. Diskussion

mätning av serum haptoglobin används för att diagnostisera hemolys. Noggrannheten att mäta serumhaptoglobin hos patienter som har fått PRBC är emellertid inte känd.

i vår studie noterar vi en statistiskt signifikant minskning av de genomsnittliga serumhaptoglobinnivåerna omedelbart efter transfusion (). Denna minskning utom när haptoglobinnivåerna före transfusion är under 60 mg/dL hade dock ingen klinisk relevans eftersom det absoluta antalet fortsatte inom det normala intervallet. I sin studie rapporterade Nishiyama och Hanaoka en invers proportionalitet mellan serumhaptoglobinnivåer och åldern för transfuserat blod . De observerade att serumhaptoglobinnivåerna minskade med transfusion av minst 1000 ml eller mer helblod med en genomsnittlig lagringstid på 12.2 dagar. I vår studie var den maximala mängden transfuserade PRBC 800 ml (två patienter). Ingen av våra studiepatienter fick helblod. För indikationer som anemi är emellertid transfusion av helblod samt transfusion av massiv mängd PRBC sällsynt.

vår studie var inte driven för att studera effekten av massiva mängder PRBC-transfusion på serumhaptoglobinnivåer. Men hos de tre patienterna som fick mer än två enheter PRBC noterade vi en minskning av serumhaptoglobin hos endast en patient som hade fått fyra enheter blod, som alla var mer än trettio dagar gamla. Denna droppe noterades vid 48 timmar. Halveringstiden för haptoglobin-hemoglobinkomplexet är några minuter, så denna droppe i serumhaptoglobin vid 48 timmar kan inte förklaras av den snabba rensningen av hemoglobin-haptoglobinkomplexet som bildas efter transfusion.

Vi observerade en liten minskning av serumhaptoglobinnivåerna till under normala hos två av de fyra patienterna som transfusionerades med blod mer än 30 dagar gamla. Dessa två patienter noterades också ha en låg normal haptoglobinnivå före transfusion. Orsaken till denna nedgång är fortfarande oklar. Denna nedgång var dock övergående och verkade inte signifikant undergräva nyttan av serumhaptoglobinmätning vid diagnos av hemolys hos PRBC-mottagare.

6. Slutsats

dessa resultat tyder på att haptoglobinnivåer i serum kan användas som ett verktyg för att bedöma hemolys hos patienter som har fått flera enheter av PRBC. En liten, övergående minskning av haptoglobinnivåerna i serum kan noteras hos dessa patienter, särskilt om haptoglobinnivåerna före transfusion är normalt låga. Även om orsaken till detta är okänd, kan detta föreslå en låggradig hemolys och denna nedgång, om inte ihållande, kanske inte är kliniskt relevant.

det har också varit stort intresse för effekterna av fritt hemoglobin på kväveoxid och de resulterande vaskulära komplikationerna som ses i både akut och kronisk hemolys och dessa fynd förtjänar ytterligare undersökning.

detta var en liten prospektiv studie som syftade till att identifiera rollen av serumhaptoglobinmätning hos patienter som fick flera enheter av blodtransfusion. Ytterligare studier, med en större provstorlek, som syftar till att studera serumfria hemoglobinnivåer och serumhaptoglobinnivåer behövs för att bekräfta våra resultat och för att ytterligare utvärdera om mängden transfusion eller ålder av transfuserat blod har någon effekt på serumhaptoglobinnivåerna.

intressekonflikter

författarna har inga intressekonflikter att avslöja.