Wilson varttui Detroitissa, Michiganissa myyntimies Ralph Wilson Sr.: n ja tämän vaimon Edith Colen poikana.
valitessaan mennä pois valtion osallistua University of Virginia (jossa hän liittyi Phi Delta Theta veljeys), Wilson palasi Michigan graduate school University of Michigan Law School. Hän valmistui vuonna 1936 Detroitin yliopiston koulusta, nykyisestä University Liggett Schoolista. Toisen maailmansodan aikana hän värväytyi Yhdysvaltain laivastoon ja palveli Atlantilla ja Tyynellämerellä. Sodan päätyttyä hän otti hoitaakseen isänsä vakuutusbisneksen ja sijoitti Michiganin alueen kaivoksiin ja tehtaisiin. Lopulta hän osti useita tuotantolaitoksia, rakennusliikkeitä, televisio-ja radioasemia ja perusti Ralph Wilson Industriesin.
Detroit Lionsin vähemmistöomistaja Wilson sai vihiä Lamar Huntin suunnitelmista perustaa Uusi liiga, American Football League, haastamaan NFL. Hän yritti koota joukkuetta Miamissa, mutta se hylättiin. Hänen seuraava valintansa oli Buffalo, jossa AFL: n ykkösvalinta Pat McGroder oli kieltäytynyt perustamasta joukkuetta. Syyskuussa 1959 Wilson lähetti Huntille sähkeen, jossa luki: ”Count me in with Buffalo.”Hän nimesi uuden joukkueensa The Billsiksi, sen mukaan kuin edellinen joukkue oli pelannut All-America Football Conferencessa vuosina 1946-1949. Lokakuuta 1959 Buffalo Billsistä tuli virallisesti seitsemäs AFL-joukkue. Wilson teki ammattilaisjalkapallosta valtavan menestyksen ”pienillä markkinoilla”, allekirjoittamalla sellaisia tähtiä kuin Cookie Gilchrist, Jack Kemp ja Tom Sestak sekä Hall of Fameen Billy Shaw ja O. J. Simpson.
hän oli ohjaava voima AFL: n politiikassa, joka takasi menestyksen, kuten gate-ja televisiotulojen jakamisen. Yhtenä kolmesta AFL: n omistajasta, jotka olivat suhteellisen vakaalla taloudellisella pohjalla (Huntin ja Bud Adamsin ohella), Wilson lainasi talousvaikeuksissa olleelle Oakland Raidersille 400 000 dollaria ja oli myös halukas lainaamaan rahaa New England Patriotsin Billy Sullivanille. Wilson auttoi pitämään nämä franchising pinnalla, todennäköisesti säästää koko liigan taitto (AFL oli ainutlaatuinen keskuudessa jalkapallon ammattilaisliigoja, että ei yhden AFL franchising taitettu sen historiassa). Marraskuussa 1963 Wilson yhdessä silloisen Raidersin general Managerin Al Davisin kanssa lobbasi menestyksekkäästi, että AFL-pelejä lykättäisiin presidentti John F. Kennedyn salamurhan jälkeiseen sunnuntaihin; NFL-pelit pelattiin suunnitellusti.
Wilson oli eniten huolissaan joukkueensa taloudellisesta vakavaraisuudesta ja suhtautui pitkälti välinpitämättömästi Billsin kenttämenestykseen; O. J. Simpson totesi myöhemmin Sopimusneuvotteluistaan Billsin kanssa, että kun Simpsonin agentti kertoi Wilsonille Simpsonin mahdollisuuksista tehdä joukkueesta mestaruushaastaja, Wilson ampui takaisin ”What good would a championship do me? Kaikki haluavat palkankorotuksen.”
vuonna 1989, kun liigan komissaari Pete Rozelle ilmoitti jäävänsä eläkkeelle, Wilson kuului kuusihenkiseen komiteaan, jonka tehtävänä oli nimetä potentiaalisia ehdokkaita avoimeen tehtävään. Wilsonin ehdokas, hänen entinen pelinrakentajansa Jack Kemp kieltäytyi jatkosta, sillä hän oli jo ottanut paikan Yhdysvaltain kabinetista. (Työ meni lopulta liigan asianajaja Paul Tagliabuelle.)
Billsin nykyisen stadionin alkuperäisen nimeämissopimuksen umpeuduttua vuonna 1998 laitoksen nimi muutettiin Rich Stadiumista Ralph Wilson Stadiumiksi; se sai uuden nimeämissopimuksen vasta vuonna 2016, hänen kuolemansa ja sitä seuranneen joukkueen myynnin jälkeen. Mukaan artikkeli msn.com ”jääräpäiseksi” kuvailtu Wilson torjui lukuisia stadionin nimeämissopimuksia.
Wilson oli yksi liigan suorapuheisimmista omistajista, jopa lähellä elämänsä loppua. Wilson äänesti Cleveland Brownsin siirtoa Baltimoreen vastaan vuonna 1995. Hän julkisesti nuhteli NFL komissaari Paul Tagliabue avoimessa kirjeessä vuonna 1998 yli liigan politiikkaa, joka kielsi kritiikin erotuomareita, kun huono officiating oli suora vaikutus Bills tappio että kausi. Hän oli toinen kahdesta omistajasta (Cincinnati Bengalsin Mike Brown on toinen) vastustamaan liigan entistä (ennen vuotta 2011) työehtosopimusta. (Wilson ja Brown saivat kiitosta kaukokatseisuudestaan, kun sopimus johti myöhemmin vuoden 2011 NFL: n työsulkuun.) Hän neuvotteli myös sopimuksen, jonka mukaan hänen joukkueensa pelaisi kotiotteluita Torontossa vuosina 2008-2014.
Wilson jäi eläkkeelle presidentin tehtävästä vuonna 2001, jolloin operatiivinen ohjaus annettiin General Manager Tom Donahoelle; Wilson otti tallin toiminnan uudelleen hallintaansa vuonna 2006. Wilson jäi jälleen eläkkeelle joukkueen puheenjohtajana, tällä kertaa luovuttaen kaiken kontrollin joukkueen toiminnasta Russ Brandonille 1. tammikuuta 2013. Hän jatkoi Brandonin konsultointia joukkueen ja liigan toiminnassa kuolemaansa saakka.