anioncserélő oszlop kiválasztása

az anioncserélő oszlop kiválasztása számos, a kromatográfiás elválasztást befolyásoló tényezőtől függ, beleértve mind a célmolekula(k), mind a mintában lévő egyéb molekulák töltési jellemzőit, a minta térfogatát és koncentrációját, valamint a kromatográfiás rendszer áramlási sebességének és nyomásának határértékeit. A Bio-Rad anioncserélő oszlopok széles skáláját kínálja az Ön igényeinek kielégítésére. Az anioncserélő oszlopok különböző típusait számos alkalmazáshoz optimalizálták:

Az UNOsphere Q támogatás kötési és ellennyomási tulajdonságai:
egy 5 mg/ml BSA-mintát 10 mMTris-ben, pH8, 5-ben 1,1 x 20 cm-es oszlopra töltöttünk be. Piros, ellennyomás; kék, 10% – os áttörési kapacitás.

• nagy felbontású elválasztások
• alkalmazások a preparatív elválasztásoktól a polírozásig
• alacsony, közepes vagy nagy áramlási sebességgel fut
• különböző analit mérettartományok lefedése
• kompatibilitás az általánosan használt pufferrendszerekkel és sókkal
• mátrixok erős vagy gyenge funkcionális csoportokkal
• különböző mátrix típusok, beleértve a makroporózus és folyamatos nonporous
• alacsony ellennyomás
• kompatibilitás a különböző minta viszkozitásokkal és üzemi hőmérsékletekkel

anioncserélő oszlop kialakítása

ioncserélő a kromatográfiát a töltött molekulák elválasztására használják. Egy anioncserélő oszlopban a csomagolás pozitív töltésű, ezért coulombikus kölcsönhatás révén megtartja a negatív töltésű molekulákat. A kötött molekulákat aniongradienssel eluáljuk. Több töltött csoporttal rendelkező molekulák, például fehérjék esetében ez egy adott pufferkémia teljes töltése (pH stb.), amely meghatározza, hogy a molekula kötődik-e az oszlop állófázisához.

az anioncserélő kromatográfiás oszlopok erős vagy gyenge funkciós csoportokkal rendelkező mátrixokkal állnak rendelkezésre. Az erős anioncserélő mátrix kvaterner ammónium, és Q. a gyenge anioncserélő mátrix dietil-amino-etil vagy DEAE. Köztes szilárdságú gyanta, amely elsősorban terciert tartalmaz néhány kvaterner aminnal, szintén rendelkezésre áll.

az oszlopban lévő puffer pH-ja határozza meg a minta egyes alkotóelemeinek töltését. Az erős anioncserélő gyanták töltését a pH-változás minimálisan megváltoztatja, és széles pH-tartományban működhet. A DEAE-t jobban befolyásolják a pH-változások, a szokásos működési tartomány a pH 7-10.

a szélesebb működési pH-tartomány elérhetősége erős anioncserélő oszlopokkal lehetővé teszi a pH használatát a célmolekulák nettó töltésének megváltoztatására, hogy erősebben, gyengébben vagy egyáltalán ne kötődjenek. A kromatográfiát pozitív módban is el lehet végezni, ahol a kérdéses cél(ok) erősen kötődnek az oszlophoz, és (sok) más molekula nem kötődik olyan erősen. A negatív üzemmód gyakori a polírozásnál, ahol a szennyező anyagok az anioncserélő oszlophoz kötődnek, és a célmolekula nem kötődik, így nem marad meg az oszlopon.

az elúciót általában sógradienssel érik el. A leggyakoribb ionok a PO43–, SO42–, COO– és Cl–. Az anion kiválasztása a kívánt elúciós profiltól függ, valamint attól, hogy mely ionok kompatibilisek a vizsgált anyag(ok) jövőbeni tisztításával vagy későbbi felhasználásával.

anioncserélő oszlopok alkalmazása

az anioncserélő oszlopokat széles körben használják a biomolekulák tisztítására. A funkcionális csoportok oszloptípusainak, méretének és különböző erősségeinek széles választéka áll rendelkezésre. Az optimalizált kötési és elúciós feltételekkel kombinálva az anioncserélő oszlopkromatográfia a biomolekulák izolálásának és elemzésének minden szakaszában alkalmazható, beleértve a kezdeti tisztítást, tisztítást, az analitok elválasztását és a szennyező anyagok, például endotoxinok, gazdasejtfehérjék vagy ionos vegyületek eltávolítását.