megbeszélés és következtetés
az immunkompetens sejtek és prekurzoraik összetett eseménysorozaton mennek keresztül, amikor antigénnel megtámadják őket, hogy szaporodjanak és szintetizáljanak antitesteket, vagy részt vegyenek a celluláris immunválaszokban. Vírusfertőzés esetén széles körben elfogadott, hogy a vírussal és a vírussal összefüggő antigénekkel szembeni humorális vagy sejt által közvetített immunitás erősen védő hatású, bár egyes esetekben immunopatológiai elváltozások a vírus által indukált antigénre adott “autoimmun” típusú válasz következtében alakulnak ki a célszöveten. A vírus immunocitákkal való kölcsönhatásának ellentétes típusait, azaz a depressziót vagy az immunválasz megváltozását azonban sokkal kevésbé vizsgálták, mint az antivírus immunitását eredményező kölcsönhatásokat. Ebben a tekintetben az egér leukémia vírusokat az utóbbi években tanulmányozták az immunválaszokra gyakorolt hatások szempontjából (1-6). Egyre nyilvánvalóbbá válik, hogy a leukémia vírusok előnyösen befolyásolhatják az immunsejteket és prekurzorokat, eltérve ezeket a sejteket a normális immunválasz-képesség útjától.
az itt leírt vizsgálatokban a Friend leukémia vírus komplexet alkalmazták a vírus-limfocita kölcsönhatások természetének vizsgálatára, mind in vivo, mind in vitro. Az in vivo vizsgálatok azonban olyan problémáktól szenvednek, amelyeket az ilyen vírusok nemcsak a limfoid szövetekben, hanem nyilvánvalóan más szövetekben is replikálhatnak. Ezenkívül a fertőzött sejtek limfoid szervekbe, valamint a szervekbe történő megváltozott forgalmi mintázata jelentős bonyolultságot ad a vírus immunocitákra gyakorolt hatásainak elemzéséhez. Széles körben elismert tény, hogy a vírussal fertőzött limfociták rendellenes tartózkodási képességet mutathatnak, így a forgalom normális mintázata megszakad (17,18). Ez megmagyarázhatja a leukémia vírussal fertőzött állatok limfoid szerveinek felépítésében bekövetkezett jelentős változásokat. Ezenkívül a vírusfertőzés önmagában olyan antigéneket indukálhat, amelyek” idegenek ” a normál és még nem érintett limfoid sejtekhez, amelyek ezután káros módon reagálhatnak a fertőzött limfocitákra. Így in vivo vírusfertőzés miatt “autoimmun” típusú elváltozás léphet fel. Ennek ellenére ebben a laboratóriumban, valamint másokban végzett vizsgálatok egyértelműen kimutatták, hogy a leukémia vírussal fertőzött egerek érzékeny törzsei jelentősen depressziós antitest-érzékenységet mutatnak a T-függő antigénekre, például az SRBC-re. Más vizsgálatokban a T-függő antigénekkel szembeni immunszuppressziót igazolták. Ezenkívül a sejtes immunitás, amelyet a mycobacterium antigénekre, alloantigénekre stb., az onkornavírussal fertőzött állatokban is jelentősen depressziós lehet.
bár egyes kutatók korábban úgy érezték, hogy az ilyen depressziós immunválasz tükrözi a normál immunociták “elmozdulását” transzformált leukémiás sejtek által, kinetikai vizsgálatok azt mutatták, hogy az immunitás depressziója jóval azelőtt alakul ki, hogy a limfoid sejtek architektúrájának jelentős változásai vagy a betegség tünetei nyilvánvalóvá válnak. Valószínűnek tűnik, hogy a vírus megfertőzheti a B-sejteket vagy prekurzoraikat, és eltérhet az immunválasz normál útjától. Számos vizsgálat azt sugallta, hogy az antitest prekurzor sejtek lehetnek a mulv elsődleges célpontjai, és ha a vírusfertőzés bekövetkezik, az ilyen immunociták már nem képesek reagálni az antigénre, és immunkompetens sejtté alakulnak át. Különböző sejttranszfer-vizsgálatok alátámasztották ezt a nézetet, mivel a limfoid sejtek immunválasz felvételének képessége besugárzott recipiens egerekben jelentősen csökkent, amikor a donor állatokat korábban megfertőzték a vírussal. Nem tűnt valószínűnek, hogy a vírus átkerült a recipiensekre, különösen mivel a különféle kontrollok azt mutatták, hogy az FLV vírus nem replikálódott jól a besugárzott recipiensekben.
a fertőzött lépekkel végzett ultrastrukturális vizsgálatok alátámasztották azt a nézetet, hogy a prekurzor immunkompetens sejteket elsősorban a vírusfertőzés befolyásolta. Mindazonáltal az in vitro vizsgálatok jelentős előnyei azt sugallták, hogy a leukémia vírus limfoid sejttenyészetekkel való kölcsönhatásának elemzése értékes információkat szolgáltathat a leukémia vírus immunválaszokra gyakorolt hatásának természetéről. Erre a célra a legkülönbözőbb kísérleteket végeztek in vitro tenyészetek normál és leukémia vírussal fertőzött splenocyták. Az FLV-vel fertőzött normál egerekből származó splenocyták által okozott antitestképződés károsodása nem volt véges jellegű, mivel az ilyen splenocyták még in vitro tenyésztés esetén sem reagáltak az antigénre. A legújabb kísérletekben azonban azt találták, hogy az ilyen depressziós sejttenyészetek visszaállíthatók a normál vagy a normál antitest-reakciókészségre különféle szerekkel történő stimulációval, beleértve a bakteriális LPS-t is. Ezenkívül a fertőzött splenociták együttes termesztése optimális számú peritoneális váladékkal makrofágokban gazdag sejtek helyreállították az immunválaszt. Így valószínűnek tűnt, hogy az FLV-fertőzés megváltoztathatja a makrofág funkcióját vagy számát, legalábbis az SRBC-re való reagálás szempontjából.
meg kell jegyezni, hogy a fertőzött állatok lépsejtjei, ha viszonylag kis számban adják hozzá a normál lépsejtkultúrákhoz, depressziós antitestválaszt eredményeztek. Az ilyen szuppresszió még akkor is nyilvánvaló volt, ha a fertőzött splenocyták aránya 1:50 volt a normál donorokhoz képest. Továbbá, még akkor is, ha a fertőzött splenocitákat elválasztották a normál lépsejtektől a sejt át nem eresztő membránokkal, amelyek immunszuppressziót jeleztek. Az ilyen szuppressziót azonban blokkolhatjuk anti-FLV szérum bármelyik kamrába történő hozzáadásával, jelezve, hogy a szérum valószínűleg megakadályozta a fertőzött sejteket abban, hogy egy anyagot szabadítsanak fel a membránon, feltehetően vírust, vagy megvédheti a normál cél splenocitákat attól, hogy a membránon áthaladó anyag megváltoztassa őket. A leukémia vírussal fertőzött splenocyták tisztított sejtmentes kivonatai a normál lépsejtekhez adva szintén jelentősen elnyomták az immunválaszt.
a tisztított kivonatok megfelelő in vivo és in vitro vizsgálatok szerint fertőző vírust tartalmaztak. A vírus elleni antiszérum megakadályozta a tisztított kivonatok szuppresszív hatását. A korábbi vizsgálatokban azonban azt találták, hogy a vírusokban gazdag tisztázatlan kivonatok nem gátolták a normál lépsejtkultúrák várható immunválaszát in vitro. Valószínűnek tűnt, hogy a tisztázatlan kivonatok nemcsak fertőző vírust, hanem nem fertőző vírust és törmeléket is tartalmaztak. Ezért további vizsgálatok során kis mennyiségű tisztított kivonatot adtunk a normál lépsejtkultúrákhoz. Az immunválasz depressziója nem fordult elő, még akkor sem, ha ezt követően tisztított vírust adtak hozzá. Ha azonban a tisztázatlan sejtmentes kivonatokat először ultracentrifugációnak vetették alá, akkor a fertőző vírust elválasztották, amely elnyomhatja az immunválaszt, míg a vírussal összefüggő törmeléket és feltehetően nem fertőző vírust tartalmazó nem fertőző pellet blokkolta az immunszuppressziót. Így valószínűnek tűnik, hogy a tenyészetben a fertőző vírus versenyezhet a nem fertőző vírusokkal vagy vírushoz kapcsolódó antigénekkel az immunociták vagy prekurzoraik receptorai számára. Ha ez helyes, akkor valószínűnek tűnik, hogy az immunsejteken található ilyen receptorok felelősek a fertőző vírus kötődéséért, amely az immunocitával való érintkezés után behatol és replikálódik. Ez a sejt normál működésének inaktiválását vagy a sejt antigénre reagáló képességének megzavarását eredményezné. A vírussal fertőzött splenocita tenyészetek in vitro fluoreszcens mikroszkópos vizsgálata, valamint az elektronmikroszkópia alátámasztja ezt a nézetet, mivel a sejtekben jelentős változások történnek, amelyek általában Ig és theta felszíni antigének kimutatására számítanak. Sőt, a felületükön FLV antigént mutató limfoid sejtek száma in vitro nőtt a fertőzés után, egyidejűleg az SRBC-vel szembeni immunválasz csökkenésével. Az ultrastrukturális vizsgálatok, különösen a SEM által végzett vizsgálatok megerősítették a sejttípus jelentős változását mind in vivo, mind in vitro. A nagyobb sima felületű limfoid sejtek megjelenése jelentősen megváltozott felületi jellemzőkkel, beleértve számos felszíni bleb megjelenését, amelyek kapcsolatban álltak a vírus replikációjának helyeivel, közvetlenül kapcsolódott a fertőzéshez.
a leukémia vírusok, különösen az onkornavírus komplexek tisztított víruskomponensei közötti kölcsönhatásra vonatkozó további vizsgálatoknak további információkat kell szolgáltatniuk arról, hogy a vírus hogyan reagál az immunválasz-rendszer különböző sejttípusaival. Az ilyen vizsgálatoknak nemcsak a vírus által kiváltott leukemogenezis természetének elemzéséhez kell értékesnek lenniük, hanem kétségtelenül továbbra is hasznos eszközt nyújtanak az immunválasz különböző paramétereinek boncolására.