Detección en el sitio del estudio y en el sujeto

Los ensayos clínicos se llevaron a cabo en el Centro de Investigación Clínica de los Hospitales de la Universidad de Michigan con la aprobación de la Junta de Revisión Institucional para Estudios con Sujetos Humanos y de la Administración de Alimentos y Medicamentos. Se obtuvo el consentimiento informado de cada sujeto.

Los sujetos fueron evaluados de acuerdo con la edad, el peso y la capacidad de cumplir con los protocolos. Se les hizo un examen de salud / enfermedad, y uso de medicamentos, alcohol y tabaco. Se evaluó el equilibrio electrolítico de la sangre, la función renal y hepática y la morfología de la sangre y los lípidos. La entrada requerida concentraciones para el estudio de mecanismo se 5.18 mmol l−1 (>200 mg dl−1) colesterol total, 4.14 mmol l−1 (>160 mg dl−1) lipoproteínas de baja densidad (LDL-colesterol) y 3.triglicéridos l−1 de 39 mmol (dl 300 mg dl−1). Para el estudio a largo plazo, el colesterol total se requiere para ser 5.18–7.77 mmol l−1 (200-300 mg dl−1), LDL-colesterol 3.37 mmol l−1 (>130 mg dl−1) y los triglicéridos de 4,52 mmol l−1 (⩽400 mg dl−1). A las mujeres en edad fértil se les hizo una prueba de embarazo y se les indicó que usaran métodos anticonceptivos durante el estudio.

Estudio del mecanismo

De los 12 sujetos, ocho eran mujeres con edad media de 39,5 (rango, 29-59) años, colesterol total medio de 6,48 (rango, 5,57–7.51) mmol l−1 (250 (rango, 215-290) mg dl–1) y peso medio 79,3 (rango, 58,3-116,3) kg. Los valores correspondientes para los cuatro hombres fueron 36,5 (rango, 34-40) años, 6,60 (5,57–7,64) mmol l−1 (255 (rango, 215-295) mg dl−1) colesterol total y 94,5 (rango, 84,5–106,8) kg.

Hubo cuatro fases de estudio de 1 semana, con un período de lavado de 1 semana entre fases. En cada fase, administrada de acuerdo con un diseño cruzado aleatorizado, ciego simple, los sujetos consumieron 250 ml de un postre de gelatina sin azúcar que contenía 5 g de HPMC (fases de prueba) o sin HPMC (fase de placebo). El postre de gelatina se consumió durante el desayuno, el almuerzo y la cena, por un total de 15 g de HPMC por día durante cada fase de prueba.

Las viscosidades (medidas de acuerdo con la Farmacopea de los Estados Unidos, 2003) del postre de gelatina de las cuatro fases fueron: gelatina placebo (0,3 cP), HPMC de viscosidad media (3915 cP), HPMC de viscosidad alta (22 703 cP) y HPMC de viscosidad ultra alta (63 030 cP). Todos los productos HPMC (The Dow Chemical Company, Midland, MI, EE. UU.) eran aptos para alimentos y cumplían con la monografía Hipromelosa Tipo 2208 (Farmacopea de los Estados Unidos, 2003).

La ingesta de alimentos se controló a lo largo del estudio de mecanismos para garantizar que la única diferencia dietética entre los grupos fuera la presencia o ausencia de HPMC. Los sujetos comieron todas las comidas en el Centro de Investigación Clínica General, seleccionando las comidas correspondientes a su dieta habitual. En la semana 1 del estudio, se hizo un inventario de todos los alimentos consumidos. En fases posteriores, se reprodujeron los tipos y cantidades de alimentos consumidos.

En los días 1 y 8 de cada fase, después de un ayuno nocturno, se midieron el peso, los signos vitales y los lípidos séricos. Los electrolitos, la función hepática y renal y la morfología de la sangre se midieron en el primer y último día de estudio.

El efecto del HPMC en la absorción de grasa se estudió midiendo el contenido de grasa fecal. Durante las fases de placebo y de viscosidad ultra alta, todos los sujetos completaron una recolección de heces de 72 horas en los días 5, 6 y 7.

Estudio a largo plazo

De los 40 sujetos, 20 eran mujeres con edad media de 41,6 (rango, 27,3-55,9) años, colesterol total sérico medio de 5,96 (rango, 5,43–6,48) mmol l–1 (230,0 (rango, 209,8−250,2) mg dl–1), colesterol LDL medio de 4,05 (rango 3,57−4,53) mmol l-1 (156.4 (rango 137,9–174,9) mg dl-1) y peso medio 75,3 (rango, 59,8–90,8) kg. Los valores correspondientes para los 20 hombres fueron 38.3 (rango, el 25,9–50.3) años, 6.05 (rango, 5.46–6.63) mmol l−1 (233.4 (rango, 210.9–255.9) mg dl−1) colesterol total, 4.26 (rango, 3.74–4.78) mmol l−1 (164.4 (rango, 144.4–184.4) mg dl−1) LDL-colesterol y de 87.9 (rango, el 75,7–101.1) kg de peso.

Se compararon dos dosis, 5 y 15 g día−1, de HPMC de viscosidad ultra alta con placebo para la capacidad de reducir el colesterol en sujetos ligeramente hipercolesterolémicos, utilizando un diseño paralelo aleatorizado, doble ciego, controlado con placebo. HPMC se administró en una bebida de chocolate caliente con el desayuno (grupos de tratamiento de 5 y 15 g día−1) y en galletas de azúcar y melaza con el almuerzo y la cena (grupo de tratamiento de 15 g día-1). La formulación de las galletas se detalla en Swidan et al. (1996).

El número de sujetos en cada grupo de tratamiento se determinó mediante cálculos de potencia basados en la eficacia esperada para reducir el colesterol a las dos dosis (estimada en ∼1% por g de HPMC al día) y los coeficientes de variación observados previamente en los datos de colesterol total. Aunque los cálculos de potencia indicaron que cinco sujetos serían suficientes, se reclutaron 10 para el grupo de 15 g de HPMC por día y 10 para el Grupo de placebo, para tener en cuenta la menor tasa de hidratación de HPMC en las galletas y la duración del estudio. Se reclutaron veinte sujetos para el grupo de 5 g de HPMC por día porque se esperaba que el efecto reductor del colesterol fuera más modesto.

La bebida de chocolate caliente que contenía 5 g de HPMC no fue aceptada por los sujetos, que inmediatamente se quejaron vociferantemente de su no palatabilidad y amenazaron con abandonar el estudio al final de la semana 1. Posteriormente, se invocó un período de lavado de 1 semana para todos los sujetos (semana 2) y, a partir de la semana 3, todos los sujetos de prueba recibieron la formulación de galletas HPMC de 5 g en lugar de la bebida de chocolate caliente HPMC de 5 g en el desayuno. Los sujetos que recibieron el placebo fueron cambiados a una galleta de placebo en lugar del chocolate caliente de placebo para mantener el cegamiento. No hubo quejas posteriores sobre la palatabilidad. El protocolo para el estudio a largo plazo se presenta en la Tabla 1.

El estudio a largo plazo fue un estudio ambulatorio, con sujetos que informaron diariamente para recoger su mezcla de bebidas (semana 1), galletas (semanas 1, 3-8) y cualquier formulario necesario. Los sujetos consumieron sus comidas habituales junto con las formulaciones del estudio. Los diarios de alimentación y ejercicio se registraron 1 semana antes del estudio y durante las semanas 1, 4 y 8. El cumplimiento con el consumo de las formulaciones de prueba se evaluó diariamente.

El análisis de muestras y el cuestionario

Se realizaron mediciones bioquímicas y lipídicas en los Laboratorios Clínicos de los Hospitales de la Universidad de Michigan, utilizando un método validado que mostró una variación del 1% en la concentración de colesterol total (CT) dentro de la muestra y una variación del 2,2% entre días. El C-LDL se calculó a partir de las concentraciones de CT, colesterol unido a lipoproteínas de alta densidad (C-HDL) y TG utilizando la fórmula:

Las colecciones de heces fueron analizadas por la Clínica Mayo (Rochester, MN, EE.UU.) utilizando un procedimiento basado en RMN que incluía secado por microondas, seguido de una estimación del porcentaje sólido y el porcentaje de grasa a través del análisis de señales de los protones restantes (Van de Kamer, 1958). En comparación con el método gravimétrico estándar establecido, los valores de porcentaje de contenido sólido y de grasa diferían en un 2 y un 6%, respectivamente.

Los cuestionarios relativos a los efectos adversos se completaron el día 1 de ambos ensayos, el día 7 de cada fase del estudio mechanism y el día 7 durante las semanas 1, 3 y 6 del estudio a largo plazo. Los sujetos calificaron dolor de cabeza, palpitaciones, mareos, distensión abdominal, molestias gastrointestinales, calambres abdominales, diarrea y flatulencia de la siguiente manera: sin efecto (0), efecto leve (1=menos de 30 min, 2=más de 30 min), efecto moderado (3=menos de 30 min, 4=más de 30 min) y efecto severo (5=menos de 30 min y 6=más de 30 min). También se proporcionó espacio para que los sujetos registraran otros efectos adversos.

Se notificaron el número de evacuaciones intestinales y la consistencia en los días 5, 6 y 7 del estudio de mecanismos en las fases de placebo y de viscosidad ultra alta. La consistencia del movimiento intestinal se clasificó de la siguiente manera: 1 (líquido), 2 (heces sueltas, blandas y fragmentadas), 3 (heces blandas pero continuas), 4 (heces firmes) o 5 (dificultad de paso debido a rigidez).

Análisis estadístico

En el estudio mechanism, todas las medidas, excepto la grasa fecal, se probaron para detectar diferencias significativas con el análisis de varianza de medidas repetidas (SuperAnova, Abacus Concepts, Berkeley, CA, EE.UU.) utilizando el Compromiso de Tukey como prueba post hoc. Los datos de grasa fecal se analizaron con la prueba t pareada.

En el estudio a largo plazo, los datos se trataron con un análisis de varianza de medidas repetidas univariado (por ejemplo, el estadístico f univariado no ajustado) y multivariado (por ejemplo, Wilks Lambda) utilizando un paquete de Análisis Estadístico SAS (SAS Institute Inc., Cary, NC, USA). Los dos enfoques arrojaron resultados similares. Los factores analizados fueron la semana (dentro del sujeto) y el grupo de tratamiento, el sexo y la edad (entre los sujetos). Las hipótesis nulas fueron que no existían interacciones semana, semana por género, semana por edad o semana por grupo.

Todas las diferencias se consideraron significativas en el nivel de confianza del 95%.