Seleccionar uma coluna de troca de aniões

a escolha de uma coluna de troca de aniões depende de uma série de factores que afectam a separação cromatográfica, incluindo as características de carga de ambas as moléculas-alvo e de outras moléculas da amostra, o volume e a concentração da amostra e o caudal e os limites de pressão do sistema cromatográfico. Bio-Rad oferece uma ampla gama de colunas de troca de aniões para cobrir suas necessidades. Os diferentes tipos de ânions de colunas de permuta ter sido otimizado para uma série de aplicações:

Ligação e contrapressão propriedades de UNOsphere Q suporte:
5 mg/ml de amostra de BSA em 10 mMTris, pH8.5, foi carregado para uma 1,1 x 20 cm de coluna. Vermelho, contrapressão; azul, 10% de capacidade de avanço.

• Alta-resolução separações
• Aplicações a partir de separações preparativas para polimento
• Execução em baixo, médio, ou altas taxas de fluxo
• Cobrindo diferentes analito faixas de tamanho
• Compatibilidade com os sistemas comumente usados buffer de sistemas e sais
• Matrizes com forte ou fraca grupos funcionais
• matriz Diferente, tipos, incluindo macroporous e contínua nonporous
• Baixa pressão de retorno
• Compatibilidade com o exemplo diferentes viscosidades e temperaturas de funcionamento

Catião de Troca de Coluna de Design

de troca iônica a cromatografia é usada para separar moléculas carregadas. Em uma coluna de troca de aniões, o empacotamento é carregado positivamente e, portanto, retém moléculas carregadas negativamente pela interação coulombiana. As moléculas ligadas são eluídas com um gradiente de anião. Para moléculas com múltiplos grupos carregados, tais como proteínas, é a carga geral em uma dada química tampão (pH, etc.) que determina se e com que força a molécula se ligará à fase estacionária da coluna.as colunas de cromatografia de permuta aniónica estão disponíveis com matrizes com grupos funcionais fortes ou fracos. A matriz de troca de anião forte é o amônio quaternário, e é designada Q. A matriz de troca de anião fraco é dietilaminoetil, ou DEAE. Uma resina de resistência intermediária, que contém principalmente terciário com algumas aminas quaternárias, também está disponível.

o pH do tampão na coluna determina a carga de cada um dos constituintes de uma amostra. A carga de resinas de troca de aniões fortes é minimamente alterada por uma mudança de pH e pode operar em uma ampla gama de pH. O DEAE é mais afetado por alterações no pH, com uma gama de operação usual de pH 7-10.

a disponibilidade de uma gama de pH mais ampla com colunas de troca de aniões fortes fornece a capacidade de usar o pH para mudar a carga líquida das moléculas-alvo para fazê-las se ligar mais forte, mais fraca, ou não de todo. A cromatografia pode ser realizada em modo positivo, onde o(s) alvo (s) de interesse se ligam fortemente à coluna e (muitas) outras moléculas não se ligam tão fortemente. O modo negativo é comum no polimento, onde os contaminantes se ligam à coluna de troca do anião e a molécula-alvo não se liga e, portanto, não é retida na coluna.a eluição é geralmente obtida com um gradiente salgado. Os íons mais comuns são PO43 -, SO42–, COO–, e Cl -. A escolha do anião depende do perfil de eluição desejado e quais íons são compatíveis com a purificação futura ou o uso futuro do(s) analito (s).

as aplicações de colunas de permuta de anião

colunas de permuta de anião são usadas extensivamente para a purificação de biomoléculas. Há uma ampla seleção de tipos de colunas, tamanhos e diferentes pontos fortes de grupos funcionais. Combinado com condições otimizadas de ligação e eluição, a cromatografia em coluna de troca de aniões pode ser utilizada em todas as fases de isolamento e análise de biomoléculas, incluindo limpeza inicial, purificação, separação de analitos e remoção de contaminantes, tais como endotoxinas, proteínas das células hospedeiras ou compostos iônicos.