resumo

introdução. A haptoglobina liga-se à porção de globina da hemoglobina livre. A medição da haptoglobina sérica é usada como um marcador laboratorial para o diagnóstico de anemia hemolítica. Uma vez que o sangue armazenado contém hemoglobina livre, transfusão pode afetar os níveis de haptoglobina. Objectivos Do Estudo. O objectivo do estudo era avaliar se a haptoglobina sérica podia ser medida para avaliar a hemólise em doentes recentemente transfundidos. Doentes e métodos. Foram incluídos 21 doentes, que receberam mais de uma unidade de concentrado de eritrócitos (PRBCs) para indicações não-hemolíticas presumidas. Os níveis séricos de haptoglobina foram registados antes, imediatamente após, e 24 e 48 horas após transfusão. Observações e resultados. A análise da variância com medidas repetidas foi usada para examinar os níveis séricos de haptoglobina em diferentes períodos de tempo e não foi encontrada diferença significativa (). Conclusao. Os resultados sugerem que a haptoglobina sérica pode ser utilizada no diagnóstico de hemólise em doentes a receber múltiplas unidades de PRBC.

1. Introdução

haptoglobina, uma globulina alpha2, que funciona para ligar a porção de globina da hemoglobina livre no sangue, é um reagente de fase aguda. A meia-vida do séricos de haptoglobina é de aproximadamente cinco dias , mas na presença de hemoglobina livre (por exemplo, hemólise intravascular), a hemoglobina-haptoglobina complexo que forma é rapidamente eliminadas do soro por monócitos-macrófagos do sistema, com conseqüente séricos de haptoglobina níveis baixos ou ausentes. O complexo hemoglobina-haptoglobina também previne lesão tubular renal inibindo a fuga de hemoglobina através do glomerulus . Assim, um aumento da carga da hemoglobina plasmática livre causa rapidamente uma diminuição acentuada da haptoglobina sérica medida (níveis normais 36-195 mg/dL).

A Medição da haptoglobina sérica é utilizada como um dos marcadores laboratoriais para o diagnóstico de anemia hemolítica. Estudos revelaram o efeito do armazenamento prolongado na quantidade de hemoglobina livre no sangue armazenado. Nishiyama olhou para o efeito da transfusão de sangue em haptoglobina e hemoglobina livre. O autor observou que a idade do sangue armazenado aumentou a taxa de detecção da hemoglobina livre também subiu .

neste estudo, registamos os níveis de haptoglobina pré e pós – transfusão em doentes a receber múltiplas transfusões sanguíneas para anemia presumida não-hemolítica para ver se as transfusões múltiplas baixaram os valores de haptoglobina o suficiente para negar a sua utilidade no diagnóstico da anemia hemolítica em doentes transfundidos.2. Objectivos do estudo

o objectivo do estudo foi avaliar se a haptoglobina sérica podia ser medida para avaliar a hemólise em doentes recentemente transfundidos.

3. Métodos

3.1. Doentes

doentes para os quais foi feito um pedido de tipo e correspondência cruzada de duas ou mais unidades de transfusão de PRBC entre setembro de 2007 e junho de 2008 foram identificados a partir do banco de sangue do Hospital Universitário de Staten Island. Destes, os pacientes com 18 anos de idade ou mais foram abordados para a inscrição no estudo. Foram excluídos os doentes com história de transfusão sanguínea nos últimos quatro meses, história de substituição da válvula cardíaca, evidência de hepatomegalia, esplenomegalia e/ ou icterícia no exame físico, os doentes com testes anormais da função hepática ou qualquer outra evidência de hemólise na altura do registo no estudo. Foi obtido o consentimento informado por escrito para a participação no estudo e para a transfusão sanguínea. Os doentes podem retirar-se do estudo a qualquer momento. Qualquer doente que tenha desenvolvido sinais de hemólise durante o período de estudo foi removido e os níveis séricos de haptoglobina não foram utilizados na análise estatística.

3, 2. Procedimento

Uma vez obtido o consentimento informado e documentada uma indicação adequada para transfusão sanguínea, foram obtidas amostras de sangue dos doentes através de uma venopunctura periférica, que foi realizada mantendo a técnica asséptica. Os níveis séricos de haptoglobina foram medidos quatro vezes para cada doente.: uma vez antes da primeira transfusão e três vezes após a última transfusão (imediatamente após a transfusão e vinte e quatro e quarenta e oito horas após a transfusão). Estes tempos foram decididos com base na semi-vida da haptoglobina e do complexo hemoglobina – haptoglobina. Para a medição pré-transfusão da haptoglobina sérica, a amostra para o tipo e a correspondência cruzada foi utilizada o mais frequentemente possível para evitar venipuncturas adicionais. Foi também registada a idade de cada unidade de hematócrito transfundido.

3, 3. Transfusão prbc

a transfusão PRBC foi realizada pela enfermeira que cuidou do doente de acordo com as orientações recomendadas. Os PRBCs foram obtidos no banco de sangue do hospital. O conservante utilizado no PRBC foi CPD (citrato fosfato dextrose). As unidades transfundidas foram identificadas após o tipo apropriado e cruzamentos no banco de sangue. Os investigadores do estudo não estiveram envolvidos na selecção ou transfusão do PRBC.

3.4. A medição dos níveis séricos de haptoglobina

os níveis séricos de haptoglobina foram medidos no laboratório hospitalar utilizando um DXC de Beckmen Coulter Unicel, combinando um anticorpo anti-haptoglobina com a molécula de haptoglobina, formando um complexo insolúvel. Este complexo antigénio-anticorpo foi medido por absorvância óptica a 340 nanómetros utilizando o princípio da turbidimetria . A haptoglobina sérica foi notificada em miligramas por decilitro. O intervalo normal de haptoglobina sérica no nosso laboratório hospitalar é de 36-195 mg / dL.

3, 5. Estatísticas

usámos a análise da variância com uma medida repetida para examinar as diferenças de grupo nos níveis séricos de haptoglobina ao longo dos vários intervalos de tempo. O teste emparelhado de univariato foi utilizado para examinar as diferenças entre os níveis de haptoglobina pré-transfusão e pós-transfusão. Fisher Exact foi usado para dados categóricos. A significância estatística foi fixada em menos ou igual a 0,05. Os dados foram examinados utilizando o Sistema Estatístico Cruncher (2004). A dimensão da amostra de 21 doentes, medida quatro vezes com as medidas repetidas Anova, foi calculada com base num efeito moderado de 0, 2.4. Observações e resultados

um total de 21 doentes receberam 47 unidades de PRBC. A indicação mais comum para transfusão foi a perda aguda de sangue para hemorragia gastrointestinal observada em quinze pacientes, dos quais onze pacientes tiveram hemorragia hemorroidal e quatro pacientes tiveram uma fonte gastrointestinal não identificada de hemorragia. Três pacientes tiveram hemorragia menstrual pesada de fibróides uterinos, um paciente esteve envolvido em um acidente com um veículo motor resultando em perda maciça de sangue, e dois pacientes foram admitidos na unidade de cuidados críticos com insuficiência respiratória aguda por pneumonia de aspiração. Embora os níveis séricos de haptoglobina possam ser aumentados em condições inflamatórias, dos dois doentes do nosso estudo que foram admitidos com insuficiência respiratória aguda, também não se observou que tinham níveis séricos de haptoglobina anormalmente elevados.

para os vinte e um doentes, os níveis séricos de haptoglobina tomados na pré-transfusão, imediatamente após 24 horas e quarenta e oito horas após transfusão, foram examinados para detectar diferenças significativas utilizando a análise da variância com medidas repetidas. Não foram encontradas diferenças significativas após o ajuste usando a estimativa de Greenhouse-Geisser,,,. a figura 1 e a Tabela 1 demonstram os níveis de haptoglobina para todos os vinte e um doentes nos vários intervalos de tempo. O quadro 2 mostra a média, o desvio-padrão e as diferenças médias nos níveis de haptoglobina em cada intervalo de tempo. As diferenças foram examinadas usando um teste univariato emparelhado com apenas uma diferença significativa encontrada a partir de níveis de haptoglobina pré-transfusão para os níveis de haptoglobina imediatamente após transfusão (, dois lados).

Figura 1

Haptoglobina níveis para os 21 pacientes em diferentes intervalos de tempo.

nos vinte e um doentes, os níveis de haptoglobina antes da transfusão estavam todos dentro do intervalo normal. Imediatamente após a transfusão, três doentes apresentaram níveis abaixo do normal e dois destes doentes apresentaram uma diminuição persistente dos níveis de haptoglobina às 24 e 48 horas. Além disso, um doente apresentou um declínio no nível sérico de haptoglobina às 24 horas e outro às 48 horas. Ambos os doentes tinham níveis normais noutros períodos de tempo. também notámos que um total de quatro doentes receberam sangue com mais de 30 dias de idade. Destes 2 apresentavam níveis de haptoglobina inferiores a 36 mg/dL 48 horas após transfusão. Isto não foi estatisticamente significativo em, Fisher exato.

também observámos que três doentes com uma haptoglobina normal baixa no início do estudo (inferior a 60 mg/dL) tinham um nível inferior a 36 mg / dL às 48 horas. Nenhum doente com um nível superior a 60 mg/dL antes da transfusão tinha um nível anormal inferior a 36 mg/dL às 48 horas. Isto foi significativo em, Fisher exato. o nosso estudo não teve poderes para analisar o efeito de quantidades maciças de transfusões de glóbulos brancos nos níveis séricos de haptoglobina. No entanto, notamos que dos três pacientes que receberam mais de duas unidades de PRBC, apenas um tinha um nível de pós-transfusão que estava abaixo do normal e esta queda foi observada 48 horas após a transfusão. Este paciente tinha recebido quatro unidades de PRBC, todas com mais de 30 dias de idade.

5. Análise

A Medição da haptoglobina sérica é utilizada para diagnosticar a hemólise. No entanto, não é conhecida a precisão da medição da haptoglobina sérica em doentes que receberam PRBC.

no nosso estudo, observamos uma diminuição estatisticamente significativa nos níveis séricos médios de haptoglobina imediatamente após transfusão (). No entanto, esta descida, excepto quando os níveis de haptoglobina pré-transfusão são inferiores a 60 mg/dL, não teve qualquer relevância clínica uma vez que os números absolutos continuaram no intervalo normal. Em seu estudo, Nishiyama e Hanaoka relataram uma proporcionalidade inversa entre os níveis séricos de haptoglobina e a idade do sangue transfundido . Observaram que os níveis séricos de haptoglobina diminuíram com transfusões de, pelo menos, 1000 ml ou mais de sangue total, com um tempo médio de armazenamento de 12.2 dias. No nosso estudo, a quantidade máxima de PRBCs transfusionados foi de 800 ml (dois doentes). Nenhum dos nossos pacientes recebeu sangue total. No entanto, para indicações como anemia, transfusão de sangue total, bem como transfusão de grande quantidade de PRBCs é raro.o nosso estudo não teve poderes para estudar o efeito de quantidades maciças de transfusões de glóbulos brancos nos níveis séricos de haptoglobina. No entanto, nos três pacientes que receberam mais de duas unidades de Prbc, observou-se uma queda na haptoglobina sérica em apenas um paciente que recebeu quatro unidades de sangue, todas com mais de trinta dias de idade. Esta entrega foi registada às 48 horas. A semi-vida do complexo haptoglobina-hemoglobina é de alguns minutos, de modo que esta queda no soro haptoglobina em 48 horas não pode ser explicado pela rápida limpeza do complexo hemoglobina-haptoglobina formado após transfusão. observou-se uma pequena diminuição dos níveis séricos de haptoglobina para valores abaixo do normal em dois dos quatro doentes que receberam transfusão sanguínea com mais de 30 dias de idade. Verificou-se também que estes dois doentes apresentam um nível sérico de haptoglobina sérico normal baixo na pré-transfusão. A causa para este declínio permanece incerta. No entanto, este declínio foi transitório e não parece prejudicar significativamente a utilidade da medição da haptoglobina sérica no diagnóstico de hemólise nos receptores PRBC.

6. Conclusão

estes resultados sugerem que os níveis séricos de haptoglobina podem ser utilizados como uma ferramenta para avaliar a hemólise em doentes que receberam múltiplas unidades de Prbc. Nestes doentes pode observar-se uma pequena diminuição transitória dos níveis séricos de haptoglobina, especialmente se os níveis de haptoglobina pré-transfusão forem baixos normalmente. Embora a causa para isso seja desconhecida, isso pode sugerir uma hemólise de baixo grau e este declínio, a menos que persistente, pode não ser clinicamente relevante. além disso, tem havido um interesse considerável nos efeitos da hemoglobina livre no óxido nítrico e nas complicações vasculares resultantes observadas tanto na hemólise aguda como crónica e estes resultados merecem uma investigação mais aprofundada.este foi um pequeno estudo prospectivo destinado a identificar o papel da medição da haptoglobina sérica em doentes a receber múltiplas unidades de transfusão sanguínea. Estudos adicionais, com um maior tamanho da amostra, destinados a estudar os níveis de hemoglobina livre do soro e níveis de haptoglobina sérica são necessários para corroborar os nossos achados e para avaliar ainda mais se a quantidade de transfusão ou idade do sangue transfusionado tem qualquer efeito sobre os níveis de haptoglobina sérica.

conflito de interesses

os autores não têm conflitos de interesses para divulgar.