discuție și concluzie

celulele imunocompetente și precursorii lor suferă o serie complexă de evenimente atunci când sunt provocate cu un antigen, astfel încât să prolifereze și fie să sintetizeze anticorpi, fie să se implice în răspunsurile imune celulare. În cazul infecției cu virus, s-a acceptat pe scară largă că imunitatea umorală sau mediată celular la virus și antigenele asociate virusului sunt foarte protectoare, deși în unele cazuri leziunile imunopatologice apar din cauza unui răspuns de tip „autoimun” la antigenul indus de virus pe țesutul țintă. Cu toate acestea, tipurile contrastante de interacțiune a unui virus cu imunocitele, adică depresia sau modificarea reacției imune, au fost mult mai puțin studiate decât interacțiunile care au dus la imunitatea antivirus. În acest sens, virusurile leucemiei murine au fost studiate în ultimii ani în ceea ce privește efectele asupra răspunsurilor imune (1-6). Devine destul de evident că virusurile leucemice pot afecta preferențial imunocitele și precursorii, deviind aceste celule de la căile de reacție imună normală.

în studiile descrise aici, complexul virusului leucemiei prieten a fost utilizat pentru a examina natura interacțiunilor virus-limfocite, atât in vivo, cât și in vitro. Cu toate acestea, studiile in vivo suferă de problemele pe care astfel de virusuri nu numai că le pot reproduce în țesutul limfoid, dar, evident, în alte țesuturi. Mai mult, modelul de trafic modificat al celulelor infectate către organele limfoide, precum și în interiorul organelor, adaugă o complexitate majoră analizei efectelor virusului asupra imunocitelor. Este recunoscut pe scară largă faptul că limfocitele infectate cu virus pot prezenta o capacitate anormală de localizare, astfel încât modelul normal al traficului este perturbat (17,18). Acest lucru ar putea explica schimbările majore în arhitectura organelor limfoide ale animalelor infectate cu virusul leucemiei. În plus, infecția cu virus în sine poate induce antigene care sunt „străine” celulelor limfoide normale și care nu sunt încă afectate, care apoi pot răspunde într-un mod dăunător limfocitelor infectate. Astfel, o leziune de tip „autoimun” poate apărea din cauza infecției cu virus in vivo. Cu toate acestea, studiile efectuate în acest laborator, precum și altele, au arătat în mod clar că tulpinile sensibile ale șoarecilor infectați cu un virus leucemic prezintă o reacție semnificativă a anticorpilor deprimați la antigene dependente de T, cum ar fi SRBC. În alte studii a fost demonstrată imunosupresia la antigene dependente de T. Mai mult, imunitatea celulară este demonstrată prin reacția la antigeni micobacterieni, aloantigeni etc., poate fi, de asemenea, deprimat semnificativ la animalele infectate cu oncornavirus.deși s-a simțit mai devreme de unii cercetători că o astfel de reacție imună deprimată poate reflecta „deplasarea” imunocitelor normale de către celulele leucemice transformate, studiile cinetice au indicat că depresia imunității se dezvoltă cu mult înainte ca modificările marcate ale arhitecturii celulelor limfoide sau simptomele bolii să devină evidente. Pare plauzibil ca virusul să infecteze celulele B sau precursorii acestora și să le devieze de la calea normală de reacție imună. O serie de studii au sugerat că celulele precursoare ale anticorpilor pot fi o țintă preferențială pentru MuLV și că, odată ce apare infecția cu virus, astfel de imunocite nu mai sunt competente să răspundă la antigen și suferă transformarea într-o celulă imunocompetentă. Diferite studii de transfer celular au susținut acest punct de vedere, deoarece capacitatea celulelor limfoide de a monta un răspuns imun la șoarecii primitori iradiați a fost semnificativ diminuată atunci când animalele donatoare au fost infectate anterior cu virusul. Nu părea probabil ca virusul să fi fost transferat la destinatari, mai ales că diverse controale au arătat că virusul FLV nu s-a reprodus bine la destinatarii iradiați.

studiile ultrastructurale cu spline infectate au susținut opinia că celulele imunocompetente precursoare au fost afectate în principal de infecția cu virus. Cu toate acestea, avantajele marcate ale studiilor in vitro au sugerat că analiza interacțiunii unui virus leucemic cu culturile de celule limfoide ar putea oferi informații valoroase cu privire la natura efectelor virusului leucemiei asupra răspunsurilor imune. În acest scop, o mare varietate de experimente au fost efectuate acum folosind culturi in vitro de splenocite infectate cu virus normal și leucemie. Afectarea formării anticorpilor de către splenocitele de la șoarecii normali infectați cu FLV nu a fost de natură finită, deoarece astfel de splenocite nu au răspuns la antigen chiar și atunci când au fost cultivate in vitro. Cu toate acestea, în experimentele recente s-a constatat că astfel de culturi celulare deprimate ar putea fi readuse la o reacție normală sau aproape normală a anticorpilor prin stimularea cu o varietate de agenți, inclusiv LP-uri bacteriene. În plus, co-cultivarea splenocitelor infectate cu un număr optim de celule exudate peritoneale bogate în macrofage a restabilit reacția imună. Astfel, părea plauzibil că infecția cu FLV ar putea modifica funcția sau numărul macrofagelor, cel puțin în ceea ce privește capacitatea de reacție la SRBC.

trebuie remarcat faptul că celulele splinei de la animale infectate, atunci când sunt adăugate în număr relativ mic la culturile normale de celule splinice, au dus la un răspuns anticorp deprimat. O astfel de suprimare a fost evidentă chiar și cu un raport de până la 1:50 pentru splenocitele de la donatorii infectați la cei normali. Mai mult, chiar și atunci când splenocitele infectate au fost separate de celulele normale ale splinei prin membrane impermeabile celulare, imunosupresia marcată a apărut încă. Cu toate acestea, o astfel de suprimare ar putea fi blocată prin adăugarea de ser anti-FLV în oricare dintre camere, indicând faptul că serul a împiedicat probabil celulele infectate să elibereze un agent peste membrană, probabil un virus, sau ar putea proteja splenocitele țintă normale de a fi modificate de materialul care vine peste membrană. Extractele fără celule clarificate din splenocitele infectate cu virusul leucemiei, atunci când sunt adăugate la celulele normale ale splinei, au suprimat, de asemenea, semnificativ răspunsul imun.

extractele clarificate conțineau virus infecțios, așa cum se arată prin teste adecvate in vivo și in vitro. Antiserul la virus a împiedicat efectul supresiv al extractelor clarificate. Cu toate acestea, în studiile anterioare, s-a constatat că extractele neclarificate bogate în virus nu suprimă răspunsul imun așteptat al culturilor normale de celule splinice in vitro. Se pare că extractele neclarificate conțin nu numai virus infecțios, ci și virus și resturi neinfecțioase. Prin urmare, în studii suplimentare s-au adăugat cantități mici de extracte clarificate la culturile normale de celule splinice. Depresia răspunsului imun nu a avut loc, chiar dacă virusul clarificat a fost adăugat ulterior. Dacă, totuși, extractele fără celule neclarificate au fost supuse mai întâi ultracentrifugării, virusul infecțios a fost separat, ceea ce ar putea suprima răspunsul imun, în timp ce peleta neinfecțioasă, care conține resturi asociate virusului și probabil virus neinfecțios, a blocat imunosupresia. Astfel, se pare că în cultură virusul infecțios poate concura cu virusul neinfecțios sau antigenele asociate virusului pentru receptorii de pe imunocite sau precursorii acestora. Dacă acest lucru este corect, atunci se pare că astfel de receptori de pe imunocite sunt responsabili pentru legarea virusului infecțios care, în urma contactului cu imunocitul, pătrunde și se reproduce. Acest lucru ar duce apoi fie la inactivarea funcției normale a celulei, fie la întreruperea capacității celulei de a răspunde la antigen. Examinarea microscopică fluorescentă a culturilor de splenocite infectate cu virus in vitro, precum și microscopia electronică, susțin acest punct de vedere, deoarece apar modificări marcate în celule care, în mod normal, ar trebui să prezinte antigene de suprafață Ig și theta. În plus, numărul de celule limfoide care prezintă antigen FLV pe suprafața lor a crescut in vitro după infecție, concomitent cu afectarea răspunsului imun la SRBC. Studiile ultrastructurale, în special cele efectuate de SEM, au confirmat modificarea marcată a tipului de celule atât in vivo, cât și in vitro. Apariția celulelor limfoide cu suprafață netedă mai mare, cu caracteristici de suprafață semnificativ modificate, inclusiv apariția a numeroase bleburi de suprafață care au fost legate de locurile de replicare a virusului, a fost direct legată de infecție.

studii suplimentare privind interacțiunea dintre virusurile leucemice, în special componentele virale purificate ale complexelor oncornavirus, ar trebui să furnizeze informații suplimentare cu privire la modul în care un virus reacționează cu diferite tipuri de celule ale sistemului de răspuns imun. Astfel de studii ar trebui să fie valoroase nu numai pentru analiza naturii leucemogenezei induse de virus, dar vor continua, fără îndoială, să ofere un instrument util pentru disecția diferiților parametri ai reacției imune.