selectarea unei coloane de schimb de anioni

alegerea unei coloane de schimb de anioni depinde de o serie de factori care afectează separarea cromatografică, inclusiv caracteristicile de încărcare atât ale moleculei(moleculelor) țintă, cât și ale altor molecule din eșantion, volumul și concentrația eșantionului și limitele de debit și presiune ale sistemului de cromatografie. Bio-Rad oferă o gamă largă de coloane de schimb de anioni pentru a vă acoperi nevoile. Diferitele tipuri de coloane de schimb de anioni au fost optimizate pentru o serie de aplicații:

proprietățile de legare și contrapresiune ale suportului Unosphere Q:
un eșantion de 5 mg/ml de BSA în 10 mMTris, pH8.5, a fost încărcat pe o coloană de 1,1 x 20 cm. Roșu, contrapresiune; albastru, Capacitate de descoperire de 10%.

• separări de înaltă rezoluție
• aplicații de la separări preparative la lustruire
• care rulează la debite mici, medii sau mari
• care acoperă diferite intervale de dimensiuni ale analitului
• compatibilitatea cu sistemele tampon și sărurile utilizate în mod obișnuit
• matrice cu grupuri funcționale puternice sau slabe
• diferite tipuri de matrice, inclusiv macroporos>
• compatibilitate cu diferite viscozități ale eșantionului și temperaturi de funcționare

proiectarea coloanei de schimb de anioni

schimb de ioni cromatografia este utilizată pentru a separa moleculele încărcate. Într-o coloană de schimb de anioni, ambalajul este încărcat pozitiv și, prin urmare, reține moleculele încărcate negativ prin interacțiunea coulombică. Moleculele legate sunt eluate cu un gradient de anioni. Pentru moleculele cu mai multe grupuri încărcate, cum ar fi proteinele, este sarcina generală într-o chimie tampon dată (pH, etc.) care determină dacă și cât de puternic molecula se va lega de faza staționară a coloanei.

coloanele de cromatografie cu schimb de anioni sunt disponibile cu matrice care au grupuri funcționale puternice sau slabe. Matricea puternică de schimb de anioni este amoniu cuaternar și este desemnată Q. matricea slabă de schimb de anioni este dietilaminoetil, sau DEAE. O rășină de rezistență intermediară, care conține în principal terțiar cu unele Amine cuaternare, este de asemenea disponibilă.

pH-ul tamponului din coloană determină sarcina fiecăruia dintre constituenții dintr-o probă. Încărcarea rășinilor puternice schimbătoare de anioni este minim modificată de o modificare a pH-ului și poate funcționa pe o gamă largă de pH. DEAE este mai afectat de modificările pH-ului, cu un interval de funcționare obișnuit de pH 7-10.

disponibilitatea unei game mai largi de pH de lucru cu coloane puternice de schimb de anioni oferă posibilitatea de a utiliza pH-ul pentru a schimba sarcina netă a moleculelor țintă pentru a le face să se lege mai puternic, mai slab sau deloc. Cromatografia poate fi efectuată în mod pozitiv, unde ținta(țintele) de interes se leagă puternic de coloană și (multe) alte molecule nu se leagă la fel de puternic. Modul negativ este obișnuit în lustruire, unde contaminanții se leagă de coloana de schimb de anioni și molecula țintă nu se leagă și, prin urmare, nu este reținută pe coloană.

eluția se realizează de obicei cu un gradient de sare. Cei mai comuni ioni sunt PO43–, SO42–, COO– și Cl–. Alegerea anionului depinde de profilul de eluție dorit și de ce ioni sunt compatibili cu purificarea viitoare sau utilizarea viitoare a analitului(analizelor).

aplicațiile coloanelor de schimb de anioni

coloanele de schimb de anioni sunt utilizate pe scară largă pentru purificarea biomoleculelor. Există o gamă largă de tipuri de coloane, dimensiuni și diferite puncte forte ale grupurilor funcționale. Combinat cu condiții optimizate de legare și eluție, cromatografia coloanei de schimb de anioni poate fi utilizată în toate etapele izolării și analizei biomoleculelor, inclusiv curățarea inițială, purificarea, separarea analiților și îndepărtarea contaminanților, cum ar fi endotoxinele, proteinele celulelor gazdă sau compușii ionici.