rezumat

introducere. Haptoglobina leagă porțiunea de globină a hemoglobinei libere. Măsurarea haptoglobinei serice este utilizată ca marker de laborator pentru diagnosticul anemiei hemolitice. Deoarece sângele stocat conține hemoglobină liberă, transfuzia poate afecta nivelurile de haptoglobină. Obiectivele Studiului. Scopul studiului a fost de a evalua dacă haptoglobina serică ar putea fi măsurată pentru a evalua hemoliza la pacienții recent transfuzați. Pacienți și metode. Au fost înrolați douăzeci și unu de pacienți, cărora li s-au administrat mai mult de o unitate de globule roșii (BCR) ambalate pentru presupuse indicații nonhemolitice. Nivelurile serice de haptoglobină au fost înregistrate înainte, imediat după și la 24 și 48 de ore după transfuzie. Observații și rezultate. Analiza varianței cu măsuri repetate a fost utilizată pentru a examina nivelurile serice de haptoglobină la diferite perioade de timp și nu a fost găsită nicio diferență semnificativă (). Concluzie. Rezultatele sugerează că haptoglobina serică poate fi utilizată în diagnosticul hemolizei la pacienții care primesc mai multe unități de PRBC.

1. Introducere

haptoglobina, o globulină alfa2, care funcționează pentru a lega porțiunea de globină a hemoglobinei libere în sânge, este un reactant de fază acută. Timpul de înjumătățire al haptoglobinei serice este de aproximativ cinci zile , dar în prezența hemoglobinei libere (de exemplu, hemoliza intravasculară), complexul hemoglobină-haptoglobină care se formează este eliminat rapid din ser de către sistemul monocit-macrofag cu niveluri serice de haptoglobină rezultate, care sunt scăzute sau absente. Complexul hemoglobină-haptoglobină previne, de asemenea, leziunile tubulare renale prin inhibarea scăpării hemoglobinei prin glomerul . Astfel, o sarcină crescută a hemoglobinei plasmatice libere determină rapid o scădere marcată a haptoglobinei serice măsurate (niveluri normale 36-195 mg/dL).

măsurarea haptoglobinei serice este utilizată ca unul dintre markerii de laborator pentru diagnosticul anemiei hemolitice. Studiile au evidențiat efectul depozitării prelungite asupra cantității de hemoglobină liberă din sângele stocat. Nishiyama a analizat efectul transfuziei de sânge asupra haptoglobinei și a hemoglobinei libere. Autorul a menționat că, pe măsură ce vârsta sângelui stocat a crescut, rata de detectare a hemoglobinei libere a crescut și ea .

în acest studiu am înregistrat nivelurile de haptoglobină pre – și posttransfuzie la pacienții care au primit transfuzii de sânge multiple pentru anemie nonhemolitică presupusă pentru a vedea dacă transfuziile multiple au scăzut valorile haptoglobinei suficient pentru a nega utilitatea acesteia în diagnosticarea anemiei hemolitice la pacienții transfuzați.

2. Obiectivele studiului

scopul studiului a fost de a evalua dacă haptoglobina serică poate fi măsurată pentru a evalua hemoliza la pacienții transfuzați recent.

3. Metode

3.1. Pacienții

pacienții pentru care s-a efectuat o cerere de tip și potrivire încrucișată pentru două sau mai multe unități de transfuzie PRBC din septembrie 2007 până în iunie 2008 au fost identificați din Banca de sânge de la Spitalul Universitar Staten Island. Dintre aceștia, pacienții care aveau vârsta de optsprezece ani sau mai mult au fost abordați pentru înscrierea în studiu. Au fost excluși pacienții cu antecedente de transfuzie de sânge în ultimele patru luni, antecedente de înlocuire a valvei cardiace, dovezi de hepatomegalie, splenomegalie și/ sau icter la examenul fizic, cei cu teste anormale ale funcției hepatice sau orice alte dovezi de hemoliză la momentul înscrierii în studiu. A fost obținut consimțământul scris informat pentru participarea la studiu și pentru transfuzia de sânge. Pacienții se pot retrage din studiu în orice moment. Orice pacient care a dezvoltat semne de hemoliză în timpul perioadei de studiu a fost eliminat, iar nivelurile serice de haptoglobină nu au fost utilizate în analiza statistică.

3.2. Procedura

odată ce s-a obținut consimțământul informat și s-a documentat o indicație adecvată pentru transfuzia de sânge, s-au obținut probe de sânge de la pacienți printr-o venipunctură periferică, care a fost efectuată menținând tehnica aseptică. Nivelurile serice de haptoglobină au fost măsurate de patru ori pentru fiecare pacient: o dată înainte de prima transfuzie și de trei ori după ultima transfuzie (imediat posttransfuzie și douăzeci și patru și patruzeci și opt de ore după transfuzie). Aceste vremuri au fost decise pe baza timpului de înjumătățire al haptoglobinei și al complexului hemoglobină-haptoglobină. Pentru măsurarea pretransfuziei haptoglobinei serice, proba pentru tip și potrivire încrucișată a fost utilizată cât mai des posibil pentru a evita venipuncturile suplimentare. De asemenea, a fost înregistrată vârsta fiecărei unități de globule roșii transfuzate.

3.3. Transfuzia PRBC

transfuzia PRBC a fost efectuată de asistenta medicală care îngrijește pacientul conform recomandărilor recomandate. Prbc-urile au fost obținute de la banca de sânge a spitalului. Conservantul utilizat în PRBC a fost DPC (citrat fosfat dextroză). Unitățile transfuzate au fost identificate după tipul adecvat și potrivirea încrucișată în banca de sânge. Cercetătorii studiului nu au fost implicați în selectarea sau transfuzia PRBC.

3.4. Măsurarea haptoglobinei serice

nivelurile serice de haptoglobină au fost măsurate în laboratorul spitalului folosind un Beckmen Coulter UNICEL DXC prin combinarea unui anticorp antihaptoglobin cu molecula de haptoglobină, formând un complex insolubil. Acest complex antigen-anticorp a fost măsurat prin absorbanță optică la 340 nanometri folosind principiul turbidimetriei . Haptoglobina serică a fost raportată în miligrame pe decilitru. Intervalul normal de haptoglobină serică în laboratorul nostru spitalicesc este de 36-195 mg/dl.

3.5. Statistici

am folosit analiza varianței cu o măsură repetată pentru a examina diferențele de grup în nivelurile serice de haptoglobină pe diferitele intervale de timp. Testul pereche univariat a fost utilizat pentru a examina diferențele de la nivelurile de haptoglobină pretransfuzie la posttransfuzie. Fisher Exact a fost folosit pentru date categorice. Semnificația statistică a fost stabilită la mai puțin sau egal cu 0,05. Datele au fost examinate folosind Sistemul Statistic Number Cruncher (2004). Mărimea eșantionului de douăzeci și unu de pacienți măsurată de patru ori cu măsurile repetate Anova a fost calculată pe baza unei dimensiuni moderate a efectului de 0,2.

4. Observații și rezultate

un total de douăzeci și unu de pacienți au primit patruzeci și șapte de unități de PRBC. Cea mai frecventă indicație pentru transfuzie a fost pierderea acută de sânge pentru sângerare gastrointestinală observată la cincisprezece pacienți, dintre care unsprezece pacienți au avut sângerare hemoroidală și patru pacienți au avut o sursă gastrointestinală neidentificată de sângerare. Trei pacienți au avut sângerări menstruale abundente din fibroame uterine, un pacient a fost implicat într-un accident de autovehicul care a dus la pierderi masive de sânge și doi pacienți au fost internați în unitatea de îngrijire critică cu insuficiență respiratorie acută din cauza pneumoniei de aspirație. Deși nivelurile serice de haptoglobină pot fi crescute în condiții inflamatorii, dintre cei doi pacienți din studiul nostru care au fost internați cu insuficiență respiratorie acută, niciunul nu a fost observat ca având valori inițiale anormal crescute ale haptoglobinei serice.

pentru cei douăzeci și unu de pacienți, nivelurile serice de haptoglobină luate la pretransfuzie, imediat după, 24 de ore și patruzeci și opt de ore după transfuzie au fost examinate pentru diferențe semnificative folosind analiza varianței cu măsuri repetate. Nu s-au găsit diferențe semnificative după ajustarea folosind estimarea lui Greenhouse-Geisser,,,.

Figura 1 și Tabelul 1 demonstrează nivelurile de haptoglobină pentru toți cei douăzeci și unu de pacienți la diferite intervale de timp. Tabelul 2 prezintă media, deviația standard și diferențele medii ale nivelurilor de haptoglobină la fiecare interval de timp. Diferențele au fost examinate folosind testul pereche univariat, cu doar o diferență semnificativă găsită de la nivelurile de haptoglobină pretransfuzie la nivelurile de haptoglobină imediat după transfuzie (, pe două fețe).

Figura 1

nivelurile de haptoglobină pentru cei 21 de pacienți la diferite intervale de timp.

la cei douăzeci și unu de pacienți, valorile haptoglobinei înainte de transfuzie au fost toate în limitele normale. Imediat după transfuzie, trei pacienți au avut niveluri sub normal și doi dintre acești pacienți au avut o scădere persistentă a nivelurilor de haptoglobină la 24 și 48 de ore. În plus, un pacient a avut o scădere a nivelului seric de haptoglobină la 24 de ore și unul la 48 de ore. Ambii pacienți au avut niveluri normale în alte perioade de timp.

de asemenea, am observat că un total de patru pacienți au primit sânge mai mare de 30 de zile. Dintre aceștia 2 au avut niveluri de haptoglobină mai mici de 36 mg/dL la 48 de ore după transfuzie. Acest lucru nu a fost semnificativ statistic la , Fisher Exact.

am observat, de asemenea, că trei pacienți cu haptoglobină normală scăzută la momentul inițial (mai puțin de 60 mg/dL) au avut un nivel mai mic de 36 mg/dL la 48 de ore. Niciun pacient cu un nivel peste 60 mg/dL înainte de transfuzie nu a avut un nivel anormal mai mic de 36 mg/dL la 48 de ore. Acest lucru a fost semnificativ la , Fisher Exact.

studiul nostru nu a fost alimentat să analizeze efectul cantităților masive de transfuzii PRBC asupra nivelurilor serice de haptoglobină. Cu toate acestea, am observat că dintre cei trei pacienți care au primit mai mult de două unități de PRBC, doar unul a avut un nivel posttransfuzional care a fost sub normal și această scădere a fost observată la 48 de ore după transfuzie. Acest pacient a primit patru unități de PRBC, toate având o vechime mai mare de 30 de zile.

5. Discuție

măsurarea haptoglobinei serice este utilizată pentru a diagnostica hemoliza. Cu toate acestea, precizia măsurării haptoglobinei serice la pacienții care au primit PRBC nu este cunoscută.

în studiul nostru observăm o scădere semnificativă statistic a valorilor medii ale haptoglobinei serice imediat după transfuzie (). Cu toate acestea, această scădere, cu excepția cazului în care nivelurile de haptoglobină pretransfuzie sunt sub 60 mg/dL, nu a avut relevanță clinică, deoarece numerele absolute au continuat în intervalul normal. În studiul lor, Nishiyama și Hanaoka au raportat o proporționalitate inversă între nivelurile serice de haptoglobină și vârsta sângelui transfuzat . Ei au observat că nivelurile serice de haptoglobină au scăzut odată cu transfuzia de cel puțin 1000 ml sau mai mult de sânge integral, cu un timp mediu de depozitare de 12.2 zile. În studiul nostru, Cantitatea maximă de Prbc transfuzate a fost de 800 ml (doi pacienți). Niciunul dintre pacienții noștri din studiu nu a primit sânge integral. Cu toate acestea, pentru indicații precum anemia, transfuzia de sânge integral, precum și transfuzia unei cantități masive de Prbc este rară.

studiul nostru nu a fost alimentat pentru a studia efectul cantităților masive de transfuzii PRBC asupra nivelurilor serice de haptoglobină. Cu toate acestea, la cei trei pacienți care au primit mai mult de două unități de Prbc, am observat o scădere a haptoglobinei serice la un singur pacient care a primit patru unități de sânge, toate având mai mult de treizeci de zile. Această scădere a fost observată la 48 de ore. Timpul de înjumătățire al complexului haptoglobină-hemoglobină este de câteva minute, astfel încât această scădere a haptoglobinei serice la 48 de ore nu poate fi explicată prin curățarea rapidă a complexului hemoglobină-haptoglobină format după transfuzie.

am observat o mică scădere a nivelurilor serice de haptoglobină sub normal la doi dintre cei patru pacienți care au fost transfuzați cu sânge mai mult de 30 de zile. De asemenea, s-a observat că acești doi pacienți au un nivel scăzut de haptoglobină serică normală de pretransfuzie. Cauza acestui declin rămâne neclară. Cu toate acestea, această scădere a fost tranzitorie și nu pare să submineze în mod semnificativ utilitatea măsurării haptoglobinei serice în diagnosticul hemolizei la pacienții cu PRBC.

6. Concluzie

aceste rezultate sugerează că nivelurile serice de haptoglobină pot fi utilizate ca instrument pentru evaluarea hemolizei la pacienții care au primit mai multe unități de Prbc. La acești pacienți se poate observa o scădere mică, tranzitorie, a nivelurilor serice de haptoglobină, în special dacă nivelurile de haptoglobină pretransfuzie sunt scăzute în mod normal. Deși cauza pentru aceasta este necunoscută, aceasta poate sugera o hemoliză de grad scăzut și acest declin, cu excepția cazului în care este persistent, poate să nu fie relevant din punct de vedere clinic.

de asemenea, a existat un interes considerabil pentru efectele hemoglobinei libere asupra oxidului nitric și complicațiile vasculare rezultate observate atât în hemoliza acută, cât și în cea cronică, iar aceste constatări merită investigații suplimentare.

acesta a fost un mic studiu prospectiv care vizează identificarea rolului măsurării haptoglobinei serice la pacienții care au primit mai multe unități de transfuzie de sânge. Studii suplimentare, cu o dimensiune mai mare a eșantionului, care vizează studierea nivelurilor de hemoglobină fără ser și a nivelurilor de haptoglobină serică sunt necesare pentru a corobora constatările noastre și pentru a evalua în continuare dacă cantitatea de transfuzie sau vârsta sângelui transfuzat are vreun efect asupra nivelurilor serice de haptoglobină.

conflictul de interese

autorii nu au conflicte de interese de dezvăluit.