Resumen

Introducción. La haptoglobina se une a la porción de globina de la hemoglobina libre. La medición de haptoglobina sérica se utiliza como marcador de laboratorio para el diagnóstico de anemia hemolítica. Dado que la sangre almacenada contiene hemoglobina libre, la transfusión puede afectar los niveles de haptoglobina. Objetivos del Estudio. El objetivo del estudio fue evaluar si la haptoglobina sérica podía medirse para evaluar la hemólisis en pacientes recientemente transfundidos. Pacientes y Métodos. Veintiún pacientes, recibiendo a más de una unidad de concentrado de hematíes (Ch) para presume la indicaciones, se habían inscrito. Los niveles séricos de haptoglobina se registraron antes, inmediatamente después y 24 y 48 horas después de la transfusión. Observaciones y Resultados. Se utilizó un análisis de varianza con medidas repetidas para examinar los niveles séricos de haptoglobina en diferentes períodos de tiempo y no se encontró diferencia significativa (). Conclusion. Los resultados sugieren que la haptoglobina sérica se puede utilizar en el diagnóstico de hemólisis en pacientes que reciben múltiples unidades de glóbulos rojos.

1. Introducción

La haptoglobina, una globulina alfa2, que funciona para unirse a la porción de globina de la hemoglobina libre en la sangre, es un reactivo de fase aguda. La semivida de la haptoglobina sérica es de aproximadamente cinco días, pero en presencia de hemoglobina libre (por ejemplo, hemólisis intravascular), el complejo de hemoglobina-haptoglobina que se forma se elimina rápidamente del suero por el sistema monocito-macrófago con los niveles de haptoglobina séricos resultantes que son bajos o ausentes. El complejo hemoglobina-haptoglobina también previene la lesión tubular renal al inhibir el escape de hemoglobina a través del glomérulo . Por lo tanto, un aumento de la carga de hemoglobina plasmática libre causa rápidamente una marcada disminución de la haptoglobina sérica medida (niveles normales de 36 a 195 mg/dL).

La medición de haptoglobina sérica se utiliza como uno de los marcadores de laboratorio para el diagnóstico de anemia hemolítica. Los estudios han revelado el efecto del almacenamiento prolongado en la cantidad de hemoglobina libre en la sangre almacenada. Nishiyama observó el efecto de la transfusión de sangre en la haptoglobina y la hemoglobina libre. El autor señaló que a medida que la edad de la sangre almacenada aumentaba, la tasa de detección de hemoglobina libre también aumentaba .

En este estudio registramos los niveles de haptoglobina antes y después de la transfusión en pacientes que recibieron múltiples transfusiones de sangre por presunta anemia no hemolítica para ver si múltiples transfusiones disminuyeron los valores de haptoglobina lo suficiente como para negar su utilidad en el diagnóstico de anemia hemolítica en pacientes transfundidos.

2. Objetivos del estudio

El objetivo del estudio fue evaluar si la haptoglobina sérica podía medirse para evaluar la hemólisis en pacientes recientemente transfundidos.

3. Métodos

3.1. Pacientes

Los pacientes para los que se realizó una solicitud de tipo y coincidencia cruzada de dos o más unidades de transfusión de glóbulos rojos entre septiembre de 2007 y junio de 2008 fueron identificados en el banco de sangre del Hospital Universitario de Staten Island. De estos, se contactó a los pacientes de dieciocho años o más para que se inscribieran en el estudio. Se excluyeron los pacientes con antecedentes de transfusión de sangre en los últimos cuatro meses, antecedentes de reemplazo de válvula cardíaca, evidencia de hepatomegalia, esplenomegalia y/ o ictericia en el examen físico, aquellos con pruebas de función hepática anormales o cualquier otra evidencia de hemólisis en el momento de la inclusión en el estudio. Se obtuvo el consentimiento informado por escrito para la participación en el estudio y para la transfusión de sangre. Los pacientes podían retirarse del estudio en cualquier momento. Se eliminó a cualquier paciente que desarrollara signos de hemólisis durante el período de estudio, y los niveles séricos de haptoglobina no se utilizaron en el análisis estadístico.

3.2. Procedimiento

Una vez obtenido el consentimiento informado y documentada una indicación adecuada para transfusión de sangre, se obtuvieron muestras de sangre de los pacientes mediante venopunción periférica, que se realizó manteniendo una técnica aséptica. Los niveles séricos de haptoglobina se midieron cuatro veces para cada paciente: una vez antes de la primera transfusión y tres veces después de la última transfusión (inmediatamente después de la transfusión y veinticuatro y cuarenta y ocho horas después de la transfusión). Estos tiempos se decidieron en función de la vida media de la haptoglobina y el complejo hemoglobina-haptoglobina. Para la medición de la haptoglobina sérica antes de la transfusión, se utilizó la muestra de tipo y coincidencia cruzada con la mayor frecuencia posible para evitar venipunturas adicionales. También se registró la edad de cada unidad de concentrado de glóbulos rojos transfundidos.

3.3. Transfusión de hematocrito

La transfusión de hematocrito fue realizada por la enfermera que atendió al paciente según las directrices recomendadas. Los glóbulos rojos se obtuvieron del banco de sangre del hospital. El conservante utilizado en los PRBC fue CPD (citrato fosfato dextrosa). Las unidades transfundidas se identificaron después del tipo apropiado y del cotejo cruzado en el banco de sangre. Los investigadores del estudio no participaron en la selección o transfusión de los glóbulos rojos.

3,4. Medición de Haptoglobina sérica

Los niveles séricos de haptoglobina se midieron en el laboratorio del hospital utilizando un Beckmen Coulter Unicel DXC mediante la combinación de un anticuerpo antihaptoglobina con la molécula de haptoglobina, formando un complejo insoluble. Este complejo antígeno-anticuerpo se midió por absorbancia óptica a 340 nanómetros utilizando el principio de turbidimetría . La haptoglobina sérica se informó en miligramos por decilitro. El rango normal de haptoglobina sérica en el laboratorio de nuestro hospital es de 36 a 195 mg/dL.

3.5. Estadísticas

Se utilizó el análisis de varianza con una medida repetida para examinar las diferencias de grupo en los niveles séricos de haptoglobina en los diversos intervalos de tiempo. Se utilizó una prueba pareada univariada para examinar las diferencias entre los niveles de haptoglobina antes y después de la transfusión. Para los datos categóricos se utilizó el exacto de Fisher. La significación estadística se fijó en menos o igual a 0,05. Los datos se examinaron utilizando el Sistema Estadístico de Análisis de Números (2004). El tamaño de la muestra de veintiún pacientes medido cuatro veces con las medidas repetidas Anova se calculó con base en un tamaño de efecto moderado de 0,2.

4. Observaciones y resultados

Un total de veintiún pacientes recibieron cuarenta y siete unidades de CBPR. La indicación más común de transfusión fue la pérdida aguda de sangre por sangrado gastrointestinal observada en quince pacientes, de los cuales once pacientes tenían sangrado hemorroidal y cuatro pacientes tenían una fuente gastrointestinal de sangrado no identificada. Tres pacientes tenían sangrado menstrual abundante de fibromas uterinos, una paciente estuvo involucrada en un accidente automovilístico que resultó en una pérdida masiva de sangre, y dos pacientes ingresaron en la unidad de cuidados intensivos con insuficiencia respiratoria aguda por neumonía por aspiración. Aunque los niveles séricos de haptoglobina pueden aumentar en condiciones inflamatorias, de los dos pacientes de nuestro estudio que ingresaron con insuficiencia respiratoria aguda, no se observó que ninguno tuviera niveles séricos de haptoglobina basales anormalmente elevados.

Para los veintiún pacientes, los niveles séricos de haptoglobina tomados en la pretransfusión, inmediatamente después, a las 24 horas y cuarenta y ocho horas después de la transfusión, fueron examinados por diferencias significativas mediante el análisis de varianza con medidas repetidas. No se encontraron diferencias significativas después de ajustar utilizando la estimación de Greenhouse-Geisser, , , .

La Figura 1 y la Tabla 1 muestran los niveles de haptoglobina para todos los veintiún pacientes en los diversos intervalos de tiempo. La Tabla 2 muestra la media, la desviación estándar y las diferencias medias en los niveles de haptoglobina en cada intervalo de tiempo. Las diferencias se examinaron utilizando una prueba pareada univariada con solo una diferencia significativa encontrada desde los niveles de haptoglobina antes de la transfusión hasta los niveles de haptoglobina inmediatamente después de la transfusión (, de dos lados).

Figura 1.

los niveles de Haptoglobina para los 21 pacientes en distintos intervalos de tiempo.

En los veintiún pacientes, los niveles de haptoglobina antes de la transfusión estaban todos dentro del rango normal. Inmediatamente después de la transfusión, tres pacientes tuvieron niveles por debajo de lo normal y dos de estos pacientes tuvieron una disminución persistente de los niveles de haptoglobina a las 24 y 48 horas. Además, un paciente presentó una disminución en el nivel sérico de haptoglobina a las 24 horas y otro a las 48 horas. Ambos pacientes tenían niveles normales en otros períodos de tiempo.

También observamos que un total de cuatro pacientes recibieron sangre de más de 30 días de edad. De estos, 2 tenían niveles de haptoglobina inferiores a 36 mg / dL a las 48 horas después de la transfusión. Esto no fue estadísticamente significativo , exacto de Fisher.

También observamos que tres pacientes con una haptoglobina normal baja al inicio (menos de 60 mg/dL) tenían un nivel inferior a 36 mg / dL a las 48 horas. Ningún paciente con un nivel superior a 60 mg/dL antes de la transfusión tuvo un nivel anormal de menos de 36 mg/dL a las 48 horas. Esto fue significativo , exacto de Fisher.

Nuestro estudio no fue capaz de analizar el efecto de cantidades masivas de transfusión de glóbulos rojos en los niveles séricos de haptoglobina. Sin embargo, observamos que de los tres pacientes que recibieron más de dos unidades de GRP, solo uno tenía un nivel posttransfusional que estaba por debajo de lo normal y esta caída se observó a las 48 horas después de la transfusión. Este paciente había recibido cuatro unidades de hematocrito, todas con más de 30 días de edad.

5. Discusión

La medición de la haptoglobina sérica se utiliza para diagnosticar la hemólisis. Sin embargo, se desconoce la precisión de la medición de la haptoglobina sérica en pacientes que han recibido GRP.

En nuestro estudio observamos una caída estadísticamente significativa en los niveles séricos medios de haptoglobina inmediatamente después de la transfusión (). Sin embargo, esta caída, excepto cuando los niveles de haptoglobina antes de la transfusión están por debajo de 60 mg/dL, no tuvo relevancia clínica, ya que los números absolutos continuaron en el rango normal. En su estudio, Nishiyama y Hanaoka informaron una proporcionalidad inversa entre los niveles séricos de haptoglobina y la edad de la sangre transfundida . Observaron que los niveles séricos de haptoglobina disminuían con transfusión de al menos 1000 ml o más de sangre total con un tiempo medio de almacenamiento de 12.2 días. En nuestro estudio, la cantidad máxima de glóbulos rojos transfundidos fue de 800 ml (dos pacientes). Ninguno de los pacientes de nuestro estudio recibió sangre completa. Sin embargo, para indicaciones como la anemia, la transfusión de sangre completa, así como la transfusión de una cantidad masiva de glóbulos rojos es rara.

Nuestro estudio no fue desarrollado para estudiar el efecto de cantidades masivas de transfusión de glóbulos rojos en los niveles séricos de haptoglobina. Sin embargo, en los tres pacientes que recibieron más de dos unidades de glóbulos rojos, notamos una caída en la haptoglobina sérica en solo un paciente que había recibido cuatro unidades de sangre, todas con más de treinta días de edad. Esta caída se observó a las 48 horas. La vida media del complejo de haptoglobina-hemoglobina es de unos pocos minutos, por lo que esta caída en la haptoglobina sérica a las 48 horas no se puede explicar por la rápida eliminación del complejo de hemoglobina-haptoglobina formado después de la transfusión.

Observamos una pequeña disminución de los niveles séricos de haptoglobina por debajo de lo normal en dos de los cuatro pacientes que recibieron transfusiones de sangre de más de 30 días de edad. También se observó que estos dos pacientes tenían un nivel de haptoglobina sérica normal antes de la transfusión bajo. La causa de esta disminución sigue sin estar clara. Sin embargo, esta disminución fue transitoria y no pareció socavar significativamente la utilidad de la medición de haptoglobina sérica en el diagnóstico de hemólisis en receptores de GRP.

6. Conclusión

Estos resultados sugieren que los niveles séricos de haptoglobina pueden ser utilizados como una herramienta para evaluar la hemólisis en pacientes que han recibido múltiples unidades de CCRP. En estos pacientes se puede observar un descenso pequeño y transitorio en los niveles séricos de haptoglobina, especialmente si los niveles de haptoglobina antes de la transfusión son bajos normalmente. Aunque se desconoce la causa de esto, esto puede sugerir una hemólisis de bajo grado y esta disminución, a menos que sea persistente, puede no ser clínicamente relevante.

Además, ha habido un interés considerable en los efectos de la hemoglobina libre sobre el óxido nítrico y las complicaciones vasculares resultantes observadas en la hemólisis aguda y crónica, y estos hallazgos merecen una mayor investigación.

Se trata de un pequeño estudio prospectivo cuyo objetivo es identificar el papel de la medición de haptoglobina sérica en pacientes que reciben múltiples unidades de transfusión sanguínea. Se necesitan más estudios, con un tamaño de muestra más grande, dirigidos a estudiar los niveles de hemoglobina libre en suero y los niveles de haptoglobina en suero para corroborar nuestros hallazgos y evaluar más a fondo si la cantidad de transfusión o la edad de la sangre transfundida tiene algún efecto sobre los niveles de haptoglobina en suero.

Conflicto de Intereses

Los autores no tienen conflictos de interés a revelar.