Discussion et conclusion

Les cellules immunocompétentes et leurs précurseurs subissent une série complexe d’événements lorsqu’elles sont confrontées à un antigène de manière à proliférer et à synthétiser des anticorps ou à être impliquées dans les réponses immunitaires cellulaires. Dans le cas d’une infection virale, il a été largement admis que l’immunité humorale ou à médiation cellulaire au virus et aux antigènes associés au virus sont hautement protectrices, bien que dans certains cas, des lésions immunopathologiques surviennent en raison d’une réponse de type « auto-immune” à l’antigène induit par le virus sur le tissu cible. Cependant, les types d’interaction contrastés d’un virus avec les immunocytes, c’est-à-dire la dépression ou l’altération de la réactivité immunitaire, ont été beaucoup moins étudiés que les interactions entraînant une immunité antivirus. À cet égard, les virus de la leucémie murine ont été étudiés ces dernières années en termes d’effets sur les réponses immunitaires (1-6). Il devient tout à fait évident que les virus de la leucémie peuvent affecter préférentiellement les immunocytes et les précurseurs, déviant ces cellules des voies de la réactivité immunitaire normale.

Dans les études décrites ici, le complexe viral de la leucémie Friend a été utilisé pour examiner la nature des interactions virus-lymphocytes, à la fois in vivo et in vitro. Cependant, les études in vivo souffrent des problèmes que ces virus peuvent non seulement se répliquer dans le tissu lymphoïde, mais évidemment dans d’autres tissus. De plus, la modification du schéma de circulation des cellules infectées vers les organes lymphoïdes, ainsi qu’à l’intérieur des organes, ajoute une complexité majeure à l’analyse des effets du virus sur les immunocytes. Il est largement reconnu que les lymphocytes infectés par le virus peuvent présenter une capacité anormale de prise de tête, de sorte que le schéma normal de la circulation est perturbé (17,18). Cela pourrait expliquer les changements majeurs dans l’architecture des organes lymphoïdes des animaux infectés par le virus de la leucémie. De plus, l’infection virale en soi peut induire des antigènes ”étrangers » aux cellules lymphoïdes normales et non encore affectées qui peuvent alors répondre de manière néfaste aux lymphocytes infectés. Ainsi, une lésion de type ”auto-immune » peut survenir en raison d’une infection virale in vivo. Néanmoins, des études menées dans ce laboratoire ainsi que dans d’autres ont montré clairement que des souches sensibles de souris infectées par un virus de la leucémie présentent une réactivité nettement réduite des anticorps aux antigènes T dépendants tels que le SRBC. Dans d’autres études, une immunosuppression aux antigènes T dépendants a été démontrée. De plus, l’immunité cellulaire se manifeste par la réactivité aux antigènes mycobactériens, aux alloantigènes, etc., peut également être nettement déprimé chez les animaux infectés par un oncornavirus.

Bien que certains chercheurs aient estimé plus tôt qu’une telle réactivité immunitaire déprimée pouvait refléter un « déplacement” des immunocytes normaux par des cellules leucémiques transformées, des études cinétiques ont indiqué que la dépression de l’immunité se développait bien avant que des altérations marquées de l’architecture des cellules lymphoïdes ou des symptômes de la maladie ne deviennent évidents. Il semble plausible que le virus puisse infecter les cellules B ou leurs précurseurs et les dévier de la voie normale de la réactivité immunitaire. Un certain nombre d’études ont suggéré que les cellules précurseurs d’anticorps pourraient être une cible préférentielle pour le MuLV et qu’une fois l’infection virale survenue, ces immunocytes ne sont plus compétents pour répondre à l’antigène et subissent une transformation en cellule immunocompétente. Diverses études sur le transfert cellulaire ont soutenu ce point de vue, car la capacité des cellules lymphoïdes à monter une réponse immunitaire chez les souris receveuses irradiées était nettement diminuée lorsque les animaux donneurs étaient auparavant infectés par le virus. Il ne semblait pas probable que le virus ait été transféré aux receveurs, d’autant plus que divers contrôles ont montré que le virus FLV ne se répliquait pas bien chez les receveurs irradiés.

Des études ultrastructurales avec des spleens infectés ont soutenu l’opinion selon laquelle les cellules immunocompétentes précurseurs étaient principalement affectées par l’infection virale. Néanmoins, les avantages marqués des études in vitro suggèrent que l’analyse de l’interaction d’un virus de la leucémie avec des cultures de cellules lymphoïdes pourrait fournir des informations précieuses sur la nature des effets du virus de la leucémie sur les réponses immunitaires. À cette fin, une grande variété d’expériences ont maintenant été réalisées en utilisant des cultures in vitro de splénocytes infectés par le virus normal et la leucémie. L’altération de la formation d’anticorps par les splénocytes de souris normales infectées par le FLV n’était pas de nature limitée puisque ces splénocytes ne répondaient pas à l’antigène même en culture in vitro. Cependant, dans des expériences récentes, il a été constaté que de telles cultures cellulaires déprimées pouvaient être restaurées à une réactivité normale ou presque normale des anticorps par stimulation avec une variété d’agents, y compris des LPS bactériens. De plus, la co-culture de splénocytes infectés avec un nombre optimal de cellules d’exsudat péritonéal riches en macrophages a restauré la réactivité immunitaire. Il semblait donc plausible que l’infection par le FLV puisse altérer la fonction ou le nombre des macrophages, du moins en termes de réactivité au SRBC.

Il convient de noter que les cellules de la rate d’animaux infectés, lorsqu’elles sont ajoutées en relativement petit nombre à des cultures normales de cellules de la rate, ont entraîné une réponse anticorps déprimée. Une telle suppression était évidente même avec un rapport aussi bas que 1: 50 pour les splénocytes de donneurs infectés par rapport à des donneurs normaux. De plus, même lorsque les splénocytes infectés étaient séparés des cellules normales de la rate par des membranes imperméables aux cellules, une immunosuppression marquée se produisait encore. Une telle suppression, cependant, pourrait être bloquée par l’ajout de sérum anti-FLV dans l’une ou l’autre des chambres, indiquant que le sérum empêchait probablement les cellules infectées de libérer un agent à travers la membrane, probablement un virus, ou pourrait protéger les splénocytes cibles normaux d’être altérés par le matériau traversant la membrane. Des extraits clarifiés sans cellules de splénocytes infectés par le virus de la leucémie, lorsqu’ils sont ajoutés à des cellules normales de la rate, ont également nettement supprimé la réponse immunitaire.

Les extraits clarifiés contenaient des virus infectieux comme le montrent des essais appropriés in vivo et in vitro. L’antisérum au virus empêchait l’effet suppresseur des extraits clarifiés. Dans des études précédentes, cependant, il avait été constaté que des extraits non clarifiés riches en virus ne supprimaient pas la réponse immunitaire attendue de cultures normales de cellules spléniques in vitro. Il semblait probable que les extraits non clarifiés contenaient non seulement des virus infectieux, mais également des virus et des débris non infectieux. Par conséquent, dans des études supplémentaires, de petites quantités d’extraits clarifiés ont été ajoutées à des cultures normales de cellules de la rate. La dépression de la réponse immunitaire ne s’est pas produite, même si un virus clarifié a été ajouté par la suite. Cependant, si les extraits non clarifiés sans cellules étaient d’abord soumis à une ultracentrifugation, le virus infectieux était séparé, ce qui pouvait supprimer la réponse immunitaire, tandis que la pastille non infectieuse, contenant des débris associés au virus et vraisemblablement un virus non infectieux, bloquait l’immunosuppression. Il semble donc probable qu’en culture un virus infectieux puisse rivaliser avec un virus non infectieux ou des antigènes associés au virus pour les récepteurs sur les immunocytes ou leurs précurseurs. Si cela est correct, il semble alors probable que de tels récepteurs sur les immunocytes soient responsables de la liaison du virus infectieux qui, après contact avec l’immunocyte, pénètre et se réplique. Cela entraînerait alors soit une inactivation de la fonction normale de la cellule, soit une perturbation de la capacité de la cellule à répondre à l’antigène. L’examen au microscope fluorescent de cultures de splénocytes infectées par le virus in vitro, ainsi que la microscopie électronique, confirment ce point de vue, car des altérations marquées se produisent dans les cellules qui devraient normalement présenter des antigènes de surface Ig et thêta. De plus, le nombre de cellules lymphoïdes présentant l’antigène FLV à leur surface a augmenté in vitro après l’infection, concomitamment à une altération de la réactivité immunitaire au SRBC. Les études ultrastructurales, en particulier celles par MEB, ont confirmé l’altération marquée du type cellulaire in vivo et in vitro. L’apparition de cellules lymphoïdes à surface lisse plus grandes avec des caractéristiques de surface nettement modifiées, y compris l’apparition de nombreux globules blancs de surface qui ont été liés à des sites de réplication du virus, était directement liée à l’infection.

D’autres études concernant l’interaction entre les virus de la leucémie, en particulier les composants viraux purifiés des complexes d’oncornavirus, devraient fournir des informations supplémentaires sur la façon dont un virus réagit avec divers types de cellules du système de réponse immunitaire. De telles études devraient être utiles non seulement pour analyser la nature de la leucémogenèse induite par le virus, mais continueront sans aucun doute à fournir un outil utile pour disséquer divers paramètres de la réactivité immunitaire.