Discussione.
I linfomi a cellule T mature sono relativamente rari, rappresentando circa il 10% dei linfomi non-Hodgkins in tutto il mondo.Essi sono più comunemente visto in persone di origine asiatica o nativa americana. È fondamentale che i linfomi a cellule B e a cellule T siano differenziati l’uno dall’altro, poiché i linfomi a cellule T sono più aggressivi, sono trattati con diversi agenti chemioterapici e hanno una risposta molto più scarsa.La classificazione dell’Organizzazione Mondiale della Sanità (OMS) dei tumori ematopoietici e linfoidi sottolinea che l’immunofenotipizzazione è una parte integrante di questo processo . È noto che i linfomi a cellule B possono co-esprimere antigeni a cellule T (ad esempio, CD43). È stato anche dimostrato che fino al 40% delle neoplasie precursori delle cellule T può mostrare infedeltà di stirpe esprimendo marcatori a cellule B come CD79 e thar molti possono anche esprimere marcatori mieloidi come CD13 e CD33 . Tuttavia, le neoplasie mature delle cellule T sono generalmente considerate esprimere solo antigeni associati alle cellule T.
Descriviamo due casi di linfomi a cellule T positivi CD20. In entrambi i casi, l’immunoistochimica ha mostrato che le cellule neoplastiche sono positive per CD3, CD5 e CD20. La citometria a flusso ha confermato questi risultati e ha dimostrato che queste cellule marcano con altri antigeni specifici delle cellule T, incluso CD4. L’analisi Southern blot del caso 1 ha mostrato un riarrangiamento monoclonale del gene TCR beta e nessun riarrangiamento del gene IHC (Immunoglobulin Heavy Chain), mentre l’analisi RT-PCR del caso 2 ha mostrato un riarrangiamento monoclonale del gene TCR gamma. L’analisi PCR per la presenza di HTLV-1 e 2 è risultata positiva nel caso 1.
Storicamente, CD20 è stato considerato come un marcatore specifico delle cellule B ed è stato utilizzato per distinguere le cellule B dalle neoplasie delle cellule T. Tuttavia, un piccolo sottoinsieme di cellule T non neoplastiche esprime CD20 debolmente in individui liberi da malattia . Due popolazioni di cellule positive CD20 possono essere dimostrate tra tutti i linfociti: CD20 luminoso e CD20 dim.Le cellule CD20 luminose mostrano altri marcatori coerenti con le normali cellule B mentre le cellule CD20 dim sono contrassegnate come cellule T. Due terzi delle cellule T CD20 dim sono CD8 positivo mentre un terzo sono CD4 positivo.Questa popolazione di cellule T ha la tendenza ad esprimere il gene γδ TCR.
Sebbene rara, l’espressione di CD20 nel linfoma / leucemia a cellule T è stata riportata in 21 casi negli ultimi due decenni . In 9 casi, sono stati effettuati studi di riarrangiamento del TCR e tutti, tranne uno, hanno dimostrato una popolazione clonale.Il nono caso ha dimostrato solo la disposizione germinale del gene TCR. Dei 21 casi precedentemente riportati, 6 erano CD8 positivi, 3 erano CD4 positivi, uno mostrava doppia espressione CD4 / CD8, uno mancava espressione di entrambi i marcatori e la rilevazione di entrambi gli antigeni non è stata riportata in 10 casi. Entrambi i nostri casi erano positivi al CD4.
Non è noto se i linfomi a cellule T positivi per CD20 rappresentino un’espressione aberrante di CD20 o siano una trasformazione maligna della sottopopolazione minore delle normali cellule T positive per CD20 precedentemente discusse. In un rapporto di Sun et al, le cellule del linfoma hanno mostrato una scarsa positività CD20 nel linfonodo, ma erano CD20 negative nelle metastasi cutanee. Una spiegazione per questo era che CD20 non era parte integrante delle cellule del linfoma ed è stato perso come il tumore progredito. Un’osservazione simile della perdita di antigene CD20 è stata fatta da Kitamura et al con un linfoma a cellule T dell’intestino tenue positivo a CD20, in cui il tumore metastatico al fegato non esprimeva CD20.Questi rapporti rendono impossibile la determinazione definitiva della cellula di origine di questi linfomi in questo momento.
Nel work-up delle neoplasie linfomatose, l’uso di studi ausiliari come la citometria a flusso è diventato una parte inestimabile del restringimento della diagnosi differenziale. Sun et al sottolineano che l’analisi della citometria a flusso è utile nel fare la distinzione tra linfomi a cellule B e T in un paio di modi. In primo luogo, CD19 è un marcatore di cellule B comune e affidabile. Tuttavia, non è disponibile come macchia immunoistochimica in ogni laboratorio, nel qual caso può essere dimostrata solo mediante citometria a flusso. In secondo luogo, i linfomi a cellule T positivi CD20 tendono ad essere CD5 luminosi e CD20 dim, mentre i linfomi a cellule B positivi CD5 tendono ad essere CD5 dim e CD20 luminosi. è differenza di intensità di colorazione può essere difficile da apprezzare al microscopio, ma è molto più evidente con citometria a flusso.
Ci sono casi in cui la citometria a flusso non può essere utilizzata, il più delle volte a causa di dimensioni del campione inadeguate o vitalità cellulare, o è semplicemente inconcludente. Di conseguenza, la diagnosi dipende dai finindings microscopici leggeri compreso il modello immunoistochimico della macchiatura. Un pannello immunoistochimico limitato può portare a diagnosi errate. Due marcatori tipici utilizzati per le cellule T e le cellule B sono CD 3 e CD20, rispettivamente. Algino et al spiegano che con un pannello così piccolo, una neoplasia a cellule B positiva al CD5 potrebbe essere persa e, allo stesso modo, un linfoma a cellule T positivo al CD20 potrebbe essere diagnosticato erroneamente. Solo con un pannello più ampio è possibile chiarire questo problema. Conclusioni analoghe sono state tratte in altre due relazioni . Le raccomandazioni attuali sarebbero l’uso di CD20 e CD79a come marcatori di cellule B e CD3 e CD5 come marcatori di cellule T.
Sebbene molte neoplasie delle cellule B e T possano essere diagnosticate correttamente utilizzando la morfologia e un solo pannello immunoistochimico limitato, è necessario un approccio multidisciplinare che includa citometria a flusso, citogenetica, sonde fluorescenti di ibridazione in situ (FISH) e studi molecolari per definire queste neoplasie in modo più completo.