sito di Studio e oggetto di screening

studi Clinici sono stati condotti presso il Centro di Ricerca Clinica dell’Università del Michigan negli Ospedali con l’approvazione del comitato di Revisione Istituzionale per gli Studi che Coinvolgono Soggetti Umani e dalla Food and Drug Administration. Il consenso informato è stato ottenuto da ciascun soggetto.

I soggetti sono stati valutati in base all’età, al peso e alla capacità di rispettare i protocolli. Sono stati sottoposti a screening per la salute/malattia e l’uso di farmaci, alcol e tabacco. Il sangue è stato valutato per l’equilibrio elettrolitico, la funzionalità renale ed epatica e la morfologia del sangue e i lipidi. Le concentrazioni di ingresso richieste per lo studio del meccanismo erano 5,18 mmol l−1 (>200 mg dl−1) colesterolo totale, 4,14 mmol l−1 (>160 mg dl-1) colesterolo lipoproteico a bassa densità (colesterolo LDL) e 3.39 mmol l−1 (⩽300 mg dl-1) trigliceridi. Per lo studio a lungo termine, il colesterolo totale doveva essere 5,18-7,77 mmol l–1 (200-300 mg dl−1), colesterolo LDL 3,37 mmol l−1 (>130 mg dl-1) e trigliceridi 4,52 mmol l−1 (⩽400 mg dl−1). Le donne in età fertile sono state sottoposte a screening per la gravidanza e istruite a utilizzare il controllo delle nascite durante lo studio.

Studio del meccanismo

Dei 12 soggetti, otto erano donne con età media 39,5 (range, 29-59) anni, colesterolo totale medio 6,48 (range, 5,57–7.51) mmol l-1 (250 (intervallo, 215-290) mg dl-1) e peso medio 79,3 (intervallo, 58,3–116,3) kg. I valori corrispondenti per i quattro uomini erano 36,5 (intervallo, 34-40) anni, 6,60 (5,57–7,64) mmol l−1 (255 (intervallo, 215-295) mg dl−1) colesterolo totale e 94,5 (intervallo, 84,5–106,8) kg.

C’erano quattro fasi di studio di 1 settimana, con un periodo di washout di 1 settimana tra le fasi. In ogni fase—somministrato secondo un progetto randomizzato, singolo cieco, crossover-i soggetti hanno consumato 250 ml di un dessert di gelatina senza zucchero contenente 5 g di HPMC (fasi di test) o nessun HPMC (fase placebo). Il dessert di gelatina è stato consumato durante la colazione, il pranzo e la cena, per un totale di 15 g di HPMC al giorno durante ogni fase di test.

Le viscosità (misurate secondo la Farmacopea degli Stati Uniti, 2003) del dessert di gelatina delle quattro fasi erano: gelatina placebo (0,3 cP), HPMC a media viscosità (3915 cP), HPMC ad alta viscosità (22 703 cP) e HPMC ad altissima viscosità (63 030 cP). Tutti i prodotti HPMC (The Dow Chemical Company, Midland, MI, USA) erano di qualità alimentare e conformi alla monografia Hypromellose Type 2208 (United States Pharmacopeia, 2003).

L’assunzione di cibo è stata controllata durante tutto lo studio del meccanismo per garantire che l’unica differenza dietetica tra i gruppi fosse la presenza o l’assenza di HPMC. I soggetti hanno mangiato tutti i pasti presso il Centro di ricerca clinica generale, selezionando i pasti corrispondenti alla loro dieta abituale. Nella settimana di studio 1, tutto il cibo consumato è stato inventariato. Nelle fasi successive sono stati riprodotti i tipi e le quantità di cibo consumato.

Nei giorni 1 e 8 di ciascuna fase, dopo un digiuno notturno, sono stati misurati peso, segni vitali e lipidi sierici. Elettroliti, funzionalità epatica e renale e morfologia del sangue sono stati misurati nel primo e nell’ultimo giorno di studio.

L’effetto di HPMC sull’assorbimento dei grassi è stato studiato misurando il contenuto di grassi fecali. Durante le fasi placebo e ultra-high-viscosity, tutti i soggetti hanno completato una raccolta di feci di 72 ore nei giorni 5, 6 e 7.

Studio a lungo termine

Dei 40 soggetti, 20 erano donne con età media 41,6 (range, 27,3-55,9) anni, colesterolo totale sierico medio 5,96 (range, 5,43–6,48) mmol l–1 (230,0 (range, 209,8−250,2) mg dl–1), colesterolo LDL medio 4,05 (range 3,57−4,53) mmol l-1 (156.4 (intervallo 137,9–174,9) mg dl-1) e peso medio 75,3 (intervallo, 59,8–90,8) kg. I valori corrispondenti per gli uomini 20 erano 38.3 (intervallo, 25.9–50.3) anni, 6.05 (intervallo, 5.46–6.63) mmol l−1 (233.4 (intervallo, 210.9–255.9) mg dl−1) colesterolo totale, 4.26 (intervallo, 3.74–4.78) mmol l−1 (164.4 (intervallo, 144.4–184.4) mg dl−1) LDL-colesterolo e 87,9 (intervallo, 75,7–101,1) kg di peso.

Due dosi, 5 e 15 g die−1, di HPMC ad altissima viscosità sono state confrontate con placebo per la capacità di abbassare il colesterolo in soggetti lievemente ipercolesterolemici, utilizzando un design parallelo randomizzato, in doppio cieco, controllato con placebo. HPMC è stato somministrato in una bevanda al cioccolato caldo con colazione (5 e 15 g giorno−1 gruppi di trattamento) e in biscotti di zucchero-melassa con pranzo e cena (15 g giorno−1 gruppo di trattamento). La formulazione dei cookie è dettagliata in Swidan et al. (1996).

Il numero di soggetti in ciascun gruppo di trattamento è stato determinato mediante calcoli di potenza basati sull’efficacia attesa di riduzione del colesterolo alle due dosi (stimata in ∼1% per g HPMC al giorno) e precedentemente osservati coefficienti di variazione nei dati sul colesterolo totale. Sebbene i calcoli di potenza indicassero che cinque soggetti sarebbero stati sufficienti, 10 sono stati arruolati per il gruppo 15 g HPMC al giorno e 10 per il gruppo placebo, per tenere conto del più basso tasso di idratazione di HPMC nei biscotti e della durata dello studio. Venti soggetti sono stati arruolati per il gruppo HPMC da 5 g al giorno perché ci si aspettava che l’effetto di abbassamento del colesterolo fosse più modesto.

La bevanda al cioccolato caldo contenente 5 g HPMC non è stata accettata dai soggetti, che si sono immediatamente lamentati a gran voce della sua non appetibilità e hanno minacciato di abbandonare lo studio alla fine della settimana 1. Successivamente, è stato invocato un periodo di washout di 1 settimana per tutti i soggetti (settimana 2) e, a partire dalla settimana 3, tutti i soggetti del test hanno ricevuto la formulazione di biscotti da 5 g HPMC al posto della bevanda al cioccolato caldo da 5 g HPMC a colazione. I soggetti che hanno ricevuto il placebo sono stati passati a un biscotto placebo al posto della cioccolata calda del placebo per mantenere l’accecamento. Non ci sono stati reclami successivi riguardanti l’appetibilità. Il protocollo per lo studio a lungo termine è presentato nella Tabella 1.

Lo studio a lungo termine è stato uno studio ambulatoriale, con soggetti di reporting giornaliero di raccogliere i loro drink mix (settimana 1), i cookie (settimane 1, 3-8) e tutte le forme. I soggetti hanno consumato i loro pasti abituali insieme alle formulazioni dello studio. I diari di cibo ed esercizio sono stati registrati 1 settimana prima dello studio e durante le settimane 1, 4 e 8. La conformità con il consumo delle formulazioni di prova è stata valutata giornalmente.

Analisi di campioni e questionario

Le misurazioni biochimiche e lipidiche sono state eseguite presso i laboratori clinici degli ospedali dell’Università del Michigan, utilizzando un metodo convalidato che mostra una variazione dell ‘ 1% nella concentrazione di colesterolo totale (TC) all’interno del campione e una variazione del 2,2% tra i giorni. LDL-C è stato calcolato dalle concentrazioni di TC, colesterolo lipoproteico ad alta densità (HDL-C) e TG utilizzando la formula: