een Anionuitwisselingskolom kiezen

de keuze van een anionuitwisselingskolom hangt af van een aantal factoren die van invloed zijn op de chromatografische scheiding, waaronder de ladingskenmerken van zowel de doelmoleculen als andere moleculen in het monster, het volume en de concentratie van het monster en de debiet-en drukgrenzen van het chromatografiesysteem. Bio-Rad biedt een uitgebreid assortiment anion-uitwisselingskolommen om aan uw behoeften te voldoen. De verschillende types anionuitwisselkolommen zijn geoptimaliseerd voor een aantal toepassingen:

Binding-en tegendrukeigenschappen van unosphere Q-ondersteuning:
Een BSA-monster van 5 mg/ml in 10 mMTris, pH8.5, werd geladen op een kolom van 1,1 x 20 cm. Rood, tegendruk; Blauw, 10% doorbraakcapaciteit.

• Hoge-resolutie scheidingen
• Aanvragen van voorbereidende scheidingen te polijsten
• Uitvoeren van op een lage, medium of hoge stroomsnelheden
• over de verschillende analyt grootte varieert
• Compatibiliteit met de gebruikte buffer systemen en zouten
• Matrices met sterke of zwakke functionele groepen
• Verschillende matrix vormen, met inbegrip van macroporous continue en niet-poreuze
• Lage backpressure
• Compatibiliteit met verschillende sample viscositeiten en temperaturen

Anion Exchange Kolom Design

Ion exchange de chromatografie wordt gebruikt om geladen molecules te scheiden. In een kolom van de anionenuitwisseling, is de verpakking positief geladen en behoudt daarom negatief geladen molecules door coulombische interactie. De gebonden molecules worden geëlueerd met een aniongradiënt. Voor molecules met veelvoudige geladen groepen, zoals proteã NEN, is het de Algemene last in een bepaalde bufferchemie (pH, enz.) die bepaalt of en hoe sterk de molecule aan de kolom stationaire fase zal binden.

anionuitwisselingschromatografie kolommen zijn beschikbaar met matrices met sterke of zwakke functionele groepen. De sterke anionuitwisselingsmatrix is quaternair ammonium en wordt Q. genoemd. de zwakke anionuitwisselingsmatrix is diethylaminoethyl, of DEAE. Een tussensterktehars, dat voornamelijk tertiair bevat met enkele quaternaire aminen, is ook beschikbaar.

de pH van de buffer in de kolom bepaalt de lading van elk van de bestanddelen in een monster. De lading van sterke anionuitwisselingsharsen wordt minimaal veranderd door een verandering in pH en kan werken over een breed pH-bereik. Deae wordt meer beïnvloed door veranderingen in pH, met een gebruikelijke werkbereik van pH 7-10.

de beschikbaarheid van een breder werk pH-bereik met sterke anionuitwisselingskolommen biedt de mogelijkheid om pH te gebruiken om de netto lading van de doelmoleculen te veranderen zodat ze sterker, zwakker of helemaal niet binden. De chromatografie kan in positieve wijze worden uitgevoerd, waar het(de) doel (en) van belang sterk aan de kolom binden en (vele) andere molecules niet zo sterk binden. De negatieve wijze is gemeenschappelijk in het oppoetsen, waar de verontreinigingen aan de kolom van de anionuitwisseling binden en de doelmolecule bindt niet en zo niet op de kolom wordt behouden.

elutie wordt meestal bereikt met een zoutgradiënt. De meest voorkomende ionen zijn PO43 -, SO42 -, COO – en Cl–. De keuze van het anion hangt af van het gewenste elutieprofiel en welke ionen compatibel zijn met toekomstige zuivering of toekomstig gebruik van de analyt(s).

toepassingen van Anionuitwisselingskolommen

anionuitwisselingskolommen worden uitgebreid gebruikt voor de zuivering van biomoleculen. Er is een brede selectie van kolomtypen, maten en verschillende sterktes van functionele groepen. Gecombineerd met geoptimaliseerde band en elutievoorwaarden, kan de chromatografie van de anionuitwisseling kolom in alle stadia van biomolecule isolatie en analyse met inbegrip van aanvankelijke opschoning, reiniging, scheiding van analytes, en verwijdering van verontreinigende stoffen zoals endotoxins, de proteã nen van de gastheercel, of ionische samenstellingen worden gebruikt.