I membri della famiglia di proteine BCL-2 si distinguono per la presenza di fino a quattro diversi domini di omologia BCL-2 (designati BH1–4).6 In generale, quelli che contengono tutti e quattro i domini (BCL-2, BCL-xL e MCL-1) sono antiapoptotici, mentre quelli che contengono meno sono proapoptotici (Figura 2). Il gruppo proapoptotico può essere ulteriormente diviso in due gruppi, multidomi o membri BH123 come BAX e BAK e proteine BH3-only, tra cui BID, BIM e PUMA, tra gli altri. Le proteine BCL-2 proapoptotiche multidominio, BAX e BAK, sono espresse in modo costitutivo e inducono solo MOMP a seguito di stimoli apoptotici, suggerendo che sono inattive nelle cellule nonapoptotiche.7, 8 L’attivazione da determinate proteine BH3-only è richiesta affinchè BAX o BAK oligomerize ed inserisca stabilmente nell’OMM, un prerequisito importante per MOMP (a differenza di BAX citosolic, BAK è mitocondriale costitutivamente; ma come BAX, inserisce nella membrana solo dopo l’attivazione). Korsmeyer e colleghi hanno dimostrato che le cellule di topi privi di bax e bak sono resistenti a una vasta gamma di insulti proapoptotici sottolineando l’importanza di queste proteine nella via mitocondriale.9 Questo è anche evidenziato da recenti studi in cellule bax/bak a doppio knockout prive di fattore di crescita in cui la sopravvivenza è mantenuta da una marcata autofagia a causa dell’assenza di MOMP.10 Ciò suggerisce che quando la permeabilizzazione è inibita, le cellule rispondono mantenendo un livello minimo di sopravvivenza per essere salvate in caso di fattore di crescita o re-aggiunta di nutrienti. Pertanto, in assenza di multidomi, e quindi MOMP, il programma cellulare predefinito è quello di sostenere la vitalità.
La famiglia di proteine BCL-2. La famiglia di proteine BCL-2 è divisa in membri antiapoptotici e proapoptotici. I membri antiapoptotici includono BCL-2, BCL-xL, A1, MCL-1 e BCL-w e contengono quattro domini di omologia BCL–2 (designati BH1-4). I multidomains proapoptotici (BAX, BAK e BOK) contengono domini BH1–3. Le proteine BH3-only sono strutturalmente diverse e contengono un solo dominio conservato, il BH3. Le alfa eliche di ogni proteina sono designate e le regioni contenute all’interno di ogni dominio BH sono illustrate da linee in grassetto sotto ogni proteina. Idrofobica carbossi-terminale dominio transmembrana (TM) di ogni proteina è in silico, previsioni e/o dati strutturali e non è necessariamente presente in ogni membro
al fine di indurre la morte, proteine multidominio miselli deve essere attivato da proteine BH3-only (Figura 3a). Recentemente è emersa un’ipotesi secondo cui i membri della famiglia di proteine BH3-only possono essere divisi in due gruppi distinti: “attivatori diretti” che attivano direttamente BAX o BAK (Figura 3b) e “de-repressori” (o “sensibilizzatori”) che consentono a BAX o BAK di essere attivati sequestrando le proteine antiapoptotiche come BCL-xL o MCL-1 e consentendo il successivo rilascio di attivatori diretti precedentemente inibiti (Figura 3c).7, 11 L’evidenza suggerisce che le proteine BH3-only, BID e BIM, agiscono associandosi a BAX e BAK, ma questo sembra essere transitorio in quanto non è rilevabile in assenza di detersivo. Tuttavia, le proteine antiapoptotiche, BCL-2, MCL-1 e BCL-xL, inibiscono questa interazione legandosi a BID e BIM. Gli altri membri della famiglia BH3-only (ad esempio, Noxa, BMF, HRK, BAD e BIK) non sono in grado di attivare direttamente BAX e BAK, ma possono legarsi a BCL-xL, BCL-2 e/o MCL-1 in vari gradi. Il modello diretto attivatore / de-repressore suggerisce che queste ultime proteine rilasciano BID e BIM dai loro partner antiapoptotici consentendo l’attivazione di BAX e BAK in modo indiretto. Tuttavia, un’altra interpretazione di questi risultati è che le proteine BH3-only funzionano per antagonizzare i membri antiapoptotici della famiglia BCL-2, piuttosto che impegnarsi BAX o BAK.12 Questa nozione spiega perché le combinazioni delle proteine BH3-only sono necessarie per indurre la morte cellulare poiché ciascuna dimostra la selettività nei bersagli prosurvival vincolanti. È importante notare che la maggior parte della letteratura proteica BH3-only si basa su dati derivati utilizzando solo il peptide BH3 della proteina corrispondente e non su una proteina biologicamente rilevante a figura intera. Simile a una proteina BH3-only, p53 può funzionare per attivare direttamente BAX, mentre è stato anche descritto per legarsi a BCL-xL e BCL-2 simile a una proteina BH3-only de-repressore.13, 14, 15 È importante sottolineare che, poiché sono state descritte solo tre proteine ad attivatore diretto(BID, BIM e p53), anche altre proteine possono avere questa (e) funzione (e).
Due meccanismi di attivazione del multidominio proapoptotico da parte delle proteine BH3-only. (a) Centrale per MOMP è l’attivazione e l’oligomerizzazione di BAX o BAK. Queste proteine, una volta attivate da una proteina BH3-only, sono ciò che crea pori nell’OMM che consentono il rilascio di proteine intramembrane al citosol. (b) Attivatore diretto BH3-solo proteine, per esempio, BIM e BID, può indurre l’oligomerizzazione e l’attivazione di BAX o BAK in assenza di altre proteine. Attraverso un’interazione transitoria con BAX o BAK, l’attivatore diretto BH3-solo proteine (BID è mostrato in questo esempio), o peptidi derivati dalla regione BH3, indurre MOMP e citocromo c rilascio. (c) Un sottoinsieme di proteine BH3-only, i de-repressori, non può indurre l’attivazione di BAX o BAK da soli. In questo scenario, una proteina BH3-only attivatore diretto viene sequestrata da una proteina BCL-2 antiapoptotica. Dopo lo sforzo, una proteina de-repressor BH3-only è indotta, tramite upregulation trascrizionale o modifica post-traduzionale e questa proteina poi lega ad una proteina BCL-2 antiapoptotica che promuove il rilascio di una proteina sequestrata e diretta dell’attivatore BH3-only. In questo esempio, il BIM è sequestrato da BCL-xL e l’induzione di BAD consente il rilascio del BIM di impegnarsi MOMP
Così, sembra che ci sia una serie di controlli ed equilibri nel citosol dove attivazione di proteine multidominio miselli non solo richiede un attivatore diretto proteine BH3-only, ma anche la repressione della famiglia BCL-2 antiapoptotici membri da ulteriori proteine BH3-only (forse anche per il tramite di transcriptional downregulation o di una maggiore degradazione delle proteine). Quindi, qual è il passo di impegno che, una volta preso, si tradurrà in MOMP? È l’attivazione di BAX / BAK o l’induzione della funzione proteica BH3-only? Le proteine BH3-only vengono attivate in risposta a diversi stimoli specifici per ciascun membro della famiglia, e quindi i loro regolatori servono come “sensori” primari per lo stress cellulare. BID viene attivato dopo la scissione da caspasi-8, granzyme B e più debolmente da caspasi-2 e -3 ed è impegnato in risposta alla stimolazione del recettore della morte, all’uccisione citotossica dei linfociti T e allo shock termico, rispettivamente.16, 17, 18, 19, 20, 21 Il BIM, d’altra parte, è tenuto inattivo nella cellula attraverso il legame con la catena leggera di dynein-1 (DLC1) e può attivare multidomains solo dopo il rilascio dal citoscheletro.22 Altre proteine BH3-only come BAD sono attivate dalla defosforilazione, mentre PUMA e Noxa sono trascrizionalmente sovraregolati da p53 e altri stimoli proapoptotici.23, 24 In presenza di proteine BCL-2 antiapoptotiche, l’attivazione di una proteina BH3-only attivatrice diretta non è generalmente considerata sufficiente per indurre MOMP in quanto verrà sequestrata dalle proteine antiapoptotiche, e quindi è richiesta anche una o più proteine BH3-only de-repressor. È quindi probabile che gli stessi stimoli che attivano BID o BIM attivino anche il depressore collaterale BH3-solo proteine. Ad esempio, BMF si lega anche ai complessi motori della miosina (DLC2) e quindi può rilevare cambiamenti citoscheletrici simili a BIM.25 Tuttavia, l’attivazione delle proteine BH3-only probabilmente non è sufficiente per assicurare che ogni cellula inizi MOMP. Questo è certamente il caso in molti tumori umani in cui BCL-2 è sovraespresso conferendo resistenza alla chemioterapia.26 È probabile che siano necessarie più cascate di segnalazione per avviare MOMP, forse attraverso gli sforzi combinati della regolazione trascrizionale e della complessa modifica post-traslazionale (scissione, fosforilazione, ecc.). Considerando la complessità e l’irreversibilità di MOMP, suggeriamo che l’attivazione sfrenata di BAX o BAK è l’ultimo impegno per la morte cellulare.
MOMP: (Come) i mitocondri sono realmente coinvolti?
Per definizione, MOMP si verifica nell’OMM, ma questo non ci offre una spiegazione di come si verifica. Ci sono vari modi in cui i mitocondri possono regolare la propria permeabilizzazione e questi provengono da IMM o OMM.
La membrana interna
La membrana interna può causare o controllare MOMP attraverso il coinvolgimento del poro di transizione della permeabilità mitocondriale (mPT).27 Il poro mPT è un complesso composto da diverse proteine tra cui VDAC (voltage-dependent anion channel), ANT e cyclophilin D (cypD), che coprono le IMMs e le OMM dove ANT si trova sulla membrana interna e VDAC si trova sulla membrana esterna (Figura 4a). Apertura di questo poro permette un afflusso di ioni e altre piccole molecole nella matrice mitocondriale causando gonfiore della matrice, inducendo la rottura del OMM e quindi MOMP. Il poro mPT è stato implicato come responsabile di MOMP in alcuni scenari, tra cui condizioni di stress ER o ROS. È stato proposto che durante l’apoptosi indotta da stress ER, Ca2 + viene rilasciato dall’ER e viene assorbito dai mitocondri con conseguente rilascio del citocromo c e apoptosi. Il rilascio del citocromo c indotto da Ca2+dai mitocondri sembrava verificarsi in assenza di BAX e BAK (sebbene BAX e BAK possano funzionare per controllare il rilascio di Ca2+ da ER) suggerendo il coinvolgimento dei pori mPT.28 Tuttavia, in condizioni fisiologiche, la quantità di calcio rilasciata dall’ER non è sufficiente per indurre mPT nei mitocondri, portando all’ipotesi che l’mPT indotto da Ca2+si verifichi in quei mitocondri che sono prossimali all’ER. Se è così, allora MOMP dovrebbe verificarsi solo in queste impostazioni in un piccolo sottoinsieme di mitocondri, una previsione che non è supportata da osservazioni dirette del rilascio del citocromo c29, 30 (osservazioni non pubblicate).
(a) Rappresentazione schematica del modello dei pori mPT. L’ipotetico poro mPT è composto da VDAC, ANT e una serie di altre proteine. L’apertura del poro tiene conto un afflusso di acqua e di ioni nella matrice che induce il gonfiamento e la rottura dell’OMM e molto probabilmente provoca la necrosi. Varie proteine sono state suggerite per regolare il mPT compreso l’esochinasi (HK) ed il PBR. (b) Altre proteine sono state suggerite per regolare MOMP, specificamente la formazione del poro di BAX (o di BAK) compreso VDAC2 e le proteine che regolano la fissione e la fusione mitocondriali. Inoltre, componenti mitocondriali possono autonomamente indurre MOMP tra ROS prodotte dalla catena di trasporto degli elettroni, che possono causare l’apertura del mPT poro, ma ugualmente può indurre apoptosi attraverso l’attivazione di proteine BH3-only nel citoplasma
Recentemente, un certo numero di modelli genetici, hanno chiamato in causa l’importanza di mPT come un generale induttore di MOMP. ANT sembra essere dispensabile in quanto i topi privi di ANT possono ancora subire mPT, mentre le cellule prive di cypD (quindi non hanno mPT) non hanno mostrato alcuna differenza in Ca2+indotta o in una varietà di altre forme di apoptosi, sebbene la necrosi indotta da Ca2+fosse difettosa.31, 32, 33 Questi risultati dei topi Ppif KO (il gene che codifica cypD) suggeriscono che mPT potrebbe non essere richiesto durante l’apoptosi (almeno nella maggior parte dei casi) e si verifica durante l’ischemia e la necrosi indotta da ROS; tuttavia, il ruolo e il meccanismo della morte rimangono sconosciuti.31 Inoltre, poiché mPT è altamente sensibile alla temperatura, il rilascio coordinato del citocromo c a temperature diverse argomenta contro qualsiasi tipo di reazione a catena mPT.5, 29 Presi insieme, questi dati suggeriscono che il poro mPT, sebbene importante per la morte necrotica, potrebbe non essere necessario per MOMP che si verifica durante l’apoptosi mitocondriale (Figura 4a).
La membrana interna può alternativamente controllare MOMP regolando OXPHOS (fosforilazione ossidativa), che a sua volta regola il potenziale transmembrana mitocondriale (ΔψM).34 Il mantenimento di ΔψM è richiesto per una varietà di funzioni mitocondriali tra cui l’importazione di proteine, la produzione di ATP e la regolazione del trasporto di metaboliti. L’insorgenza di MOMP è spesso associata a una perdita di ΔψM, ma questa perdita di ΔψM induce MOMP o si verifica come risultato di MOMP? L’interruzione di ΔψM causata dalla riduzione incompleta dell’ossigeno molecolare durante OXPHOS porta alla generazione di ROS che innesca MOMP, ma ciò può verificarsi tramite un’interazione di ROS con sensori citosolici non ancora identificati. Infatti, il ROS che viene generato durante l’apoptosi è spesso causato dalla scissione caspasi-dipendente di una subunità del complesso I della catena respiratoria e quindi può essere un sottoprodotto di MOMP piuttosto che causale.34, 35 Altrimenti, non ci sono prove convincenti che la perdita di ΔψM induca direttamente MOMP, e OXPHOS può chiaramente continuare dopo MOMP poiché, in assenza di attivazione della caspasi, non solo ΔψM può essere rigenerato, ma le cellule possono anche mantenere la produzione di ATP.34, 35, 36
La membrana esterna
Prove convincenti che la membrana interna (e in effetti la matrice) non è necessaria per MOMP e che MOMP richiede solo l’OMM sono state fornite da Kuwana et al.8 Utilizzando un approccio riduzionista per sezionare i requisiti per MOMP, hanno dimostrato che le vescicole unilamellari composte dai lipidi presenti nella membrana mitocondriale rilasciano il loro contenuto in presenza di BAX attivato. L’uso di liposomi definiti e proteine della famiglia BCL-2 ricombinanti qui può rappresentare mitocondri “semplificati”, suggerendo che l’unico requisito mitocondriale per il rilascio di proteine spaziali intermembrane è la cardiolipina, un lipido specifico per le membrane mitocondriali. Poiché non sono necessarie altre proteine per rilasciare il contenuto del liposoma, queste osservazioni favoriscono un meccanismo di MOMP in cui il BAX attivato (e/o il BAK) forma un poro nella membrana lipidica per consentire il rilascio del citocromo C. Tuttavia, questo sistema semplificato del liposoma non può riflettere esattamente la complessità del processo di permeabilizzazione come accade nell’OMM nativo e determinati stimoli possono richiedere le proteine di OMM per tenere conto la formazione del poro lipidico/del BAX. In assenza di detergente, BAX richiede membrane (liposomi contenenti cardiolipina o mitocondri) per oligomerizzare e attivare, e l’evidenza suggerisce che BCL-xL inibirà BAX solo in presenza di membrane lipidiche simili.8 Tuttavia, l’importanza della cardiolipina in questo processo è anche controversa. Nel lievito, la cardiolipina non sembra essere richiesta per la morte indotta da BAX.37 Inoltre, la presenza o la quantità esatta di cardiolipina nell’OMM non è nota e può essere presente, nella migliore delle ipotesi, in livelli molto bassi. Gli esperimenti di colorazione immunogold suggeriscono che la cardiolipina nella membrana esterna è concentrata nei punti di contatto tra l’IMM e l’OMM dove si propone di legare BAX/BID, e forse la concentrazione locale di cardiolipina in questi siti può essere sufficientemente elevata da consentire il legame di queste proteine.38, 39 In alternativa, possono esserci proteine OMM che concentrano la cardiolipina, consentendo l’inserimento di BAX e/o BAK attivati nell’OMM per mediare MOMP.
Ci sono due ulteriori livelli di regolazione potenziale che esistono nel contesto fisiologico di un OMM intatto (Figura 4b). In primo luogo, le proteine associate all’OMM, oltre ai membri della famiglia BCL-2 possono regolare direttamente il MOMP; e in secondo luogo, forse proteine aggiuntive associate all’OMM, anche oltre ai membri della famiglia BCL-2, partecipano al MOMP ma non regolano il processo. Ad esempio, molte delle proteine che sono state descritte per regolare il poro mPT hanno anche pretese di partecipare ulteriormente a MOMP. È qui che sorge una sottile differenza, e forse un aspetto trascurato di MOMP. Sebbene ci siano numerose proteine nell’OMM, la maggior parte di queste non sono richieste affinchè BAX o BAK permeabilizzino i mitocondri. Le vescicole della membrana esterna preparate dai mitocondri permeabilizzano sopra il trattamento con tBID simile ai mitocondri intatti; questo deve essere indipendente dalla funzione del poro di mPT poichè questi sono privi dei costituenti mitocondriali della membrana interna.8 Eppure, parecchie proteine all’OMM sono speculated per regolare la permeabilizzazione BAX o BAK-mediata a causa di un’associazione dimostrata con le ultime proteine. Ad esempio, BCL-2, BCL-xL, BAK e BAX hanno tutti dimostrato di legare VDAC, anche se va notato che, poiché VDAC è la proteina più abbondante dell’OMM, il legame potrebbe non essere fisiologico.40, 41, 42, 43 Più specificamente, Korsmeyer e colleghi hanno suggerito che VDAC2 inibisce l’attivazione di BAK mantenendo BAK come monomero nell’OMM (Figura 4b).44 Anche se questo può essere il caso, VDAC2 potrebbe non prendere la decisione di attivare o inattivare BAK poiché in questo scenario è una risposta del segnale citosolico allo stress cellulare, molto probabilmente una proteina BH3-only, che interrompe l’associazione VDAC2–BAK.44
Allo stesso modo, è stato suggerito che il recettore periferico delle benzodiazepine (PBR) blocchi MOMP.45, 46 Questa proteina di membrana integrale interagisce funzionalmente con il poro mPT ed è un inibitore suggerito di MOMP. Tuttavia, i requisiti per la morte cellulare non cambiano ancora, sia lo stress cellulare che le proteine BH3-only sono necessarie, poiché la semplice inibizione farmacologica o interruzione dell’attività PBR non è sufficiente affinché i mitocondri trasmettano un segnale proapoptotico; e l’uso di inibitori potrebbe certamente non riflettere le funzioni fisiologiche di queste proteine.46 Tali proteine (ad esempio, VDAC1/2 e PBR) possono associarsi a numerose proteine BCL-2, ma il segnale per MOMP non può provenire dall’interno dei mitocondri; la cellula deve generare un messaggio proapoptotico che si alimenta in avanti (stress → rilevamento cellulare → risposta cellulare → attivazione delle proteine BH3-only → attivazione BAX/BAK → MOMP) alla superficie mitocondriale per regolare queste interazioni.
Una descrizione di tale situazione “feedforward” considera il ruolo di AKT ed esochinasi I / II nella prevenzione del rilascio del citocromo c in determinate vie di sopravvivenza. L’attività di AKT sembra essere richiesta per bilanciare i requisiti per l’assorbimento del glucosio e il successivo trasporto del metabolita attraverso sia l’IMM che l’OMM regolando direttamente l’espressione e la localizzazione dell’esochinasi sull’OMM.47, 48 È interessante notare che l’attività AKT ha aumentato la massa di esochinasi sulla superficie dei mitocondri, che ha dimostrato di influenzare drammaticamente l’attività del canale VDAC.47 Quando le cellule sono state trattate con agenti che hanno interrotto l’associazione esochinasi–mitocondri, il rilascio accelerato del citocromo c si è verificato solo in seguito a ulteriore stress proapoptotico.47 Inoltre, è stata riportata una riduzione della traslocazione BAX durante casi di associazione esochinasi–mitocondriale forzata durante lo stress.47 Insieme, ciò indica che la semplice rimozione dell’esochinasi dall’OMM non è sufficiente per indurre MOMP poiché le cellule non rilasciano ancora il citocromo c in assenza di stress e che il segnale per reclutare BAX nell’OMM deve provenire dall’esterno dei mitocondri indipendentemente dalla partecipazione dell’esochinasi.
Un’altra importante classe di proteine che risiedono nell’OMM è responsabile della dinamica mitocondriale: le proteine di fusione e fissione (Figura 4b). Le dinamiche mitocondriali sono necessarie per distribuire i mitocondri alle cellule figlie dopo la mitosi e garantire che l’integrità mitocondriale sia preservata quando le membrane mitocondriali si dividono e si fondono.49 Esistono almeno quattro proteine OMM che potenzialmente partecipano o regolano MOMP: DRP-1 (una GTPasi correlata alla dinamina), endofila B1 (una transferasi lipidica necessaria per determinare la curvatura della membrana), Fis-1 (e proteina OMM integrale) e Fzo1/Mfn1 (una grande GTPasi transmembrana).50
Finora, è stato descritto che BAX e BAK, all’attivazione, si fondono con foci di scissione mitocondriale che sono composti minimamente da DRP-1 e mitofusina-2 e che BAX può interagire fisicamente con l’endofila B1 nell’OMM; tuttavia, le forme dominanti-negative di DRP-1, come DRP-1K38A carente di GTPasi, non bloccano la traslocazione di BAX dopo l’attivazione da parte di una proteina BH3-only.51, 52, 53 Ancora una volta, il segnale responsabile della promozione della traslocazione BAX all’OMM viene generato come conseguenza del particolare stress cellulare (cioè, l’insieme attivato di proteine BH3-only). Ma qual è lo scopo di BAX / BAK che interagisce con questa classe di proteine? Queste proteine partecipano semplicemente come “punti di attracco” per BAX o BAK, o c’è una regolazione attiva di MOMP coinvolta? Al momento dell’attivazione, BAX deve essere in grado di indirizzare la membrana intracellulare appropriata (cioè l’OMM) al fine di impegnare la cascata apoptotica e queste proteine possono servire ad “agganciare” BAX all’OMM. Se è vero, questa interpretazione non potrebbe essere estesa per includere BAK come è costitutivamente risiede nel OMM. Tuttavia, forse i regolatori della dinamica mitocondriale (come DRP-1 o Fis-1) si sono evoluti per partecipare a MOMP dirigendo l’azione di BAX e BAK nella regione appropriata dell’OMM consentendo la loro attività di formazione dei pori. In questo scenario, l’interazione proposta non serve a prendere la decisione cellulare di indurre MOMP, ma è ancora necessaria. È stata riportata anche un’interazione reciproca in cui i membri di BCL-2 antiapoptotici hanno promosso il rimodellamento della rete mitocondriale tramite un’interazione mitofusina-2 che ha portato alla fusione mitocondriale e alla diminuzione della sensibilità alla morte cellulare.54 In questo scenario, è stato dimostrato che CED-9, il parente di Caenorhabditis elegans BCL-2, potrebbe indurre il clustering mitocondriale. Una simile riorganizzazione mitocondriale è stata indotta anche dall’espressione forzata BCL-xL, suggerendo che questa attività potrebbe essere una funzione conservata della famiglia BCL-2.54
Un altro aspetto potenziale di questo scenario riguarda il requisito lipidico specifico per BAX (e presumibilmente, BAK) per permeabilizzare un OMM. Come discusso in precedenza, i dati in vitro suggeriscono che BAX richiede cardiolipina per oligomerizzare e impegnare l’attività di formazione dei pori.8 Poiché la cardiolipina si localizza principalmente nell’IMM, il macchinario di fusione / fissione regola anche il MOMP mediato da BAX creando l’ambiente lipidico appropriato nei siti di contatto con DRP-1 o Fis-1? Endophilin B1, una transferasi del lipido, interagisce con BAX e può servire a ridistribuire i lipidi di IMM per contattare i siti per l’attivazione efficiente di BAX (e per estensione, BAK).55, 56 Se questa attività è richiesta, l’endofilina B1 può servire da regolatore in buona fede di MOMP poiché la sua funzione necessaria può essere soggetta a dinamiche mitocondriali ed energetiche. Il problema è se la regolazione dell’endofilina B1 aiuti o meno a determinare se e quando si verificherà MOMP.